[发明专利]一种利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法

权利要求书

1.一种利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）黄酮类多酚化合物乙醇溶液的制备；

（2）甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG-SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG-NH₂）溶液的制备；

（3）水溶性聚乙二醇（PEG）化黄酮类多酚化合物的制备。

2.根据权利要求1所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：

所述步骤（1）具体为：将黄酮类多酚化合物溶解于无水乙醇中，使其得到最终浓度为2-40mM的黄酮类多酚化合物乙醇溶液；

所述步骤（2）具体为：将一定量的甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG-SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG-NH₂）溶解于磷酸盐缓冲溶液（PBS）中，至最终浓度为0.2-20mM，得到甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG-SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG-NH₂）溶液；

所述步骤（3）具体为：将步骤（1）中得到的黄酮类多酚化合物乙醇溶液和步骤（2）中得到的甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG-SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG-NH₂）溶液混合均匀，并搅拌反应2-24h；

随后将步骤（3）得到的混合后的产物放入透析袋中，并用磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析，直至透析液无颜色，确保未反应黄酮类多酚化合物透析干净；

再用纯水透析去除乙醇和磷酸盐，之后冻干得到水溶性聚乙二醇（PEG）化黄酮类多酚化合物。

3.根据权利要求1或2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（1）所述的黄酮类多酚化合物为杨梅素、黄芩苷、金丝桃苷、木犀草素、圣草酚、非瑟酮、芦丁、槲皮素、橙皮素、柚皮素、木黄酮、桑色素、橙皮苷、柚皮苷、山奈酚、白杨素中的一种。

4.权根据权利要求3所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（2）所述的甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG-SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG-NH₂）的分子量为350Da-80kDa；所述的磷酸盐缓冲溶液（PBS）的pH 5.5-8.0，浓度为5-100mM。

5.根据权利要求1或2或4所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的黄酮类多酚化合物与甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG-SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG-NH₂）的摩尔比为2-10，即黄酮类多酚化合物过量，确保甲氧基聚乙二醇巯基（mPEG-SH）或甲氧基聚乙二醇氨基（mPEG-NH2）反应完全。

6.根据权利要求2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的用磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析的具体方法为：

①先用体积比为1:1磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇混合溶液透析24h；

②然后再用体积比为1：1磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇混合溶液，同时再加入磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇混合溶液总体积一倍的纯水进行透析24h；

③最后再用体积比为1：1磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇混合溶液，同时再加入磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇混合溶液总体积三倍的纯水进行透析24h；

所述的磷酸盐缓冲溶液（PBS）的pH 5.5-8.0，浓度为5-100mM。

7.根据权利要求2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的用磷酸盐缓冲溶液（PBS）和无水乙醇的混合溶液进行梯度透析，直至透析液无颜色，确保未反应黄酮类多酚化合物透析干净，之后用纯水透析，保证磷酸盐和乙醇透析干净。

8.根据权利要求2所述的利用聚乙二醇修饰黄酮类多酚化合物的方法，其特征在于：步骤（3）所述的具体冻干的时间为48h。