[发明专利]外泌体冻干保护剂和外泌体冻干制剂的制备方法

权利要求书

1.一种外泌体冻干保护剂，其特征在于，所述外泌体冻干保护剂由缓冲体系、糖类物质、醇类物质、明胶水解物和精氨酸组成；

所述外泌体冻干保护剂以10~50 mmol/L的Tris缓冲液为缓冲体系；按照各物质在所述缓冲体系中的工作浓度计，添加糖类物质1~5 %w/v、醇类物质1~5 %w/v、明胶水解物0.1~0.5 %w/v和精氨酸50~500 mmol/L；

所述糖类物质选自海藻糖和蔗糖中的一种或多种；所述醇类物质选自甘露醇和丙三醇中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，所述外泌体冻干保护剂由缓冲体系、海藻糖、甘露醇、明胶水解物和精氨酸组成；

所述外泌体冻干保护剂以10~50 mmol/L的Tris缓冲液为缓冲体系；按照各物质在所述缓冲体系中的工作浓度计，添加海藻糖1~5 %w/v、甘露醇1~5% w/v、明胶水解物0.1~0.5 %w/v和精氨酸50~500 mmol/L。

3.根据权利要求1或2所述的冻干保护剂，其特征在于，所述外泌体冻干保护剂由缓冲体系、海藻糖、甘露醇、明胶水解物和精氨酸组成；

所述外泌体冻干保护剂以20 mmol/L的Tris缓冲液为缓冲体系；按照各物质在缓冲体系中的工作浓度计，添加海藻糖5 %w/v、甘露醇5 %w/v、明胶水解物0.1 %w/v和精氨酸100mmol/L；

或，所述外泌体冻干保护剂以20 mmol/L的Tris缓冲液为缓冲体系；按照各物质在缓冲体系中的工作浓度计，添加海藻糖5 %w/v、甘露醇5 %w/v、明胶水解物0.5 %w/v和精氨酸400 mmol/L。

4.一种外泌体冻干制剂的制备方法，其特征在于，包括：冻干包含外泌体和权利要求1~3任一项所述的外泌体冻干保护剂的混合体系。

5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，冻干起始时，外泌体在冻干保护剂中的浓度为100~600 μg/mL。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述冻干包括将所述混合体系依次进行冻干和干燥，所述冻干包括依次预冻、退火和冷冻；

所述预冻为先-8~-12℃冻干30~60min，再-40~-60℃冻干1~2 h；

所述退火为-15~-25℃冻干0.5~2 h；

所述冷冻为-40~-60℃冻干1.5~2.5 h。

7. 根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述预冻为先-10℃冻干30 min，再-50℃冻干2h；所述退火为-20℃冻干1h；所述冷冻为-50℃冻干2 h。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述干燥包括依次一次干燥和二次干燥；

所述一次干燥的条件为：温度-20℃~-30℃，时间15~20 h，真空度10~20pa；

所述二次干燥的条件为：温度20℃~25℃，时间2~5 h，真空度5~10 Pa。

9.根据权利要求4~8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述外泌体来源于乳。