[发明专利]补骨脂素甘露糖化壳聚糖聚合物纳米颗粒及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种补骨脂素甘露糖化壳聚糖聚合物纳米颗粒及其制备方法与应用，其由补骨脂素、聚乳酸‑羟基乙酸共聚物、壳聚糖和甘露糖组成，其中，补骨脂素、聚乳酸‑羟基乙酸共聚物、壳聚糖和甘露糖的质量比为2‑10∶10‑30∶16.5‑38.5∶1‑9。该补骨脂素甘露糖化壳聚糖聚合物纳米颗粒由游离的补骨脂素药物和甘露糖化壳聚糖聚合物载体组成，与传统的补骨脂素相比，具有更稳定的结构和更好的理化性质，同时生物利用度、肿瘤靶向性更高，可作为肿瘤相关巨噬细胞及细胞因子的调节剂，还可抑制MDA‑MB‑231乳腺癌细胞生长进而可应用于制备治疗三阴性乳腺癌的药物。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种补骨脂素聚合物纳米颗粒及其制备方法与应用，具体地说涉及一种补骨脂素甘露糖化壳聚糖聚合物纳米颗粒及其制备方法与应用。

背景技术

乳腺癌是女性常见恶性肿瘤之一，其中，三阴乳腺癌(TNBC)雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及人表皮生长因子受体2(HER2)表达均为阴性的乳腺癌，占乳腺癌患者总数的10～15％，具有发病早、侵袭性强、代谢重构高、预后差等特点。目前，抗肿瘤药物研究主要集中于肿瘤细胞本身，如通过改变多药耐药基因，抑制外排泵蛋白上调从而减少药物外排；抑制代谢活动，增强药物活性；调控凋亡基因表达，诱导肿瘤细胞凋亡等，但效果不甚理想，其原因之一是肿瘤细胞的发展不仅源于细胞自身改变，也涉及其所处微环境的改变。随着对TNBC肿瘤生物学认识的深入，基于肿瘤微环境(TME)的治疗策略越来越受到重视。

肿瘤微环境(TME)是指由肿瘤细胞、成纤维细胞、间充质细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞、炎性/免疫细胞及细胞外基质等构成的局部稳态环境，肿瘤微环境与正常组织微环境存在显著差异，主要表现为乏氧、弱酸性、还原性、血管密度低等特征。肿瘤微环境在增殖、免疫逃逸、远处转移等肿瘤发生发展过程中起重要作用。肿瘤微环境的免疫成分由肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、肿瘤相关中性粒细胞(TANs)、髓源抑制性细胞(MDSCs)、树突状细胞(DCs)和肿瘤浸润性淋巴样细胞(TILs)等组成。乳腺癌免疫微环境是指浸润到乳腺肿瘤内部的免疫细胞及所分泌的活性介质等与乳腺癌细胞共同构成的局部内环境，主要由TAMs、TANs、MDSCs和调节性T细胞(Tregs)细胞介导免疫抑制状态微环境。这些细胞分泌的细胞因子包括血管内皮生长因子(VEGF)、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17、TGF-β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和基质金属蛋白酶(MMPs)是TME重要组成部分，主要对肿瘤细胞发挥监视和防御作用，可直接或间接地影响肿瘤发生发展。肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)是所有乳腺癌浸润免疫细胞中最丰富的免疫细胞之一，M2巨噬细胞在免疫微环境中发挥免疫抑制作用，通过激活免疫检查点、分泌免疫抑制因子来促进乳腺癌细胞增殖。

TAMs来源于血管单个核细胞，占TME细胞总数的30％到50％。在TME的长期作用下，单核/巨噬细胞发生极化。TAMs主要分为两种表型，M1型TAMs分泌IL-1β、TNF-α、IFN-γ等免疫刺激因子，高表达肿瘤坏死因子TNF、iNOS和MHC，参与极化Th1细胞反应，激活细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)发挥抗肿瘤免疫作用；M2型TAMs分泌IL-6、IL-10、TGF-β等免疫抑制因子，高表达Arg-1、IL-10、CD163和CD206，参与肿瘤细胞的生长、转移、血管形成、免疫抑制及组织修复过程，介导肿瘤免疫逃逸发挥促肿瘤生长作用。抑制微环境中TAMs促瘤表型、诱导TAMs转化为抑瘤表型或调节两种表型TAMs比例和数量有望实现抑制三阴性乳腺癌生长，但目前针对三阴性乳腺癌TAMs调节剂的研究较少。

细胞因子是细胞间细胞转导的重要信号分子，在肿瘤微环境调控中具有重要作用，而炎性细胞因子是炎症细胞分泌的信号分子，研究表明，调控肿瘤微环境中重要免疫/炎性细胞因子的表达是治疗乳腺癌的策略之一，但目前基于单克隆抗体的细胞因子疗法效果并不明显，且往往存在副作用。因此，需要寻找新的治疗药物，实现同时调控多种细胞因子，从而显著改善肿瘤微环境。