[发明专利]一种检测阪崎克罗诺杆菌的引物对、试剂盒和方法在审
| 申请号： | 202310286349.5 | 申请日： | 2023-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN116287344A | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 翟平平;李睿;吴鑫;朱应飞;曾驰;刘中华 | 申请（专利权）人： | 江西省检验检测认证总院食品检验检测研究院;武汉轻工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 南昌大牛知识产权代理事务所(普通合伙) 36135 | 代理人： | 刘俊文 |
| 地址： | 330000 江西省南昌市南*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 阪崎克罗诺 杆菌 引物 试剂盒 方法 | ||
1.靶基因片段在检测阪崎克罗诺杆菌中的应用，其特征在于，所述靶基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种检测阪崎克罗诺杆菌的引物对，其特征在于，所述引物对根据权利要求1所述的靶基因片段设计得到，包括上游引物mngB-F和下游引物mngB-R，所述上游引物mngB-F的序列如SEQ ID NO.2所示，所述下游引物mngB-R的序列如SEQ ID NO.3所示。
3.一种检测阪崎克罗诺杆菌的试剂盒，其特征在于，包括权利要求2所述的引物对。
4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括缓冲液和无菌双蒸水。
5.根据权利要求4所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括基因抽提试剂和/或阳性基因组DNA。
6.一种非疾病的诊断或治疗目的的检测阪崎克罗诺杆菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：采用权利要求2所述的引物对对待测样品DNA进行RPA反应，反应完毕后检测是否存在阳性条带。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，RPA反应的反应体系包括：反应缓冲液Abuffer 29.4μL，反应缓冲液B buffer 29.4μL，10μM所述上游引物2μL，10μM所述下游引物2μL，无菌双蒸水13.1μL，待测样品DNA 1μL。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，RPA反应条件为：37℃-42℃，15min-40min。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，通过琼脂糖凝胶电泳检测是否存在阳性条带。
10.权利要求6所述的方法在食品检测领域中的应用。
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