[发明专利]基于MassARRAY核酸质谱技术的高血压精准用药的基因检测物及应用

说明书

本申请涉及一种基于MassARRAY核酸质谱技术的高血压精准用药的基因检测物及应用。该基因检测物针对高血压用药指导的21个SNP位点，分别为：rs1042714、rs1801253、rs28371725、rs1065852、rs2238032、rs776746、rs10494366、rs12946454、rs1801133、rs5186、rs4344、rs4359、rs1057910、rs1799853、rs16960228、rs4149601、rs7297610、rs4961、rs3892097、rs5065和rs1799752；其中包括用于扩增21个SNP位点的21对上、下游引物，所述21对上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1~42所示。采用本申请的基因检测物经过核酸质谱实验分析，能够同时对多个样本的16个基因21个SNP位点同时检测，进而为高血压用药提供合理性指导。

技术领域

本申请涉及基因检测领域，尤其是涉及一种基于MassARRAY核酸质谱技术的高血压精准用药的基因检测物及应用。

背景技术

高血压是最常见的慢性非感染性疾病，会引起心、脑、肾等脏器的并发症，是心血管病最重要的危险因素。据《2022年全国心血管疾病报告》显示，每5例死亡中就有2例死于心血管病。推算心血管病现患人数3.3亿，其中脑卒中1300万，冠心病1139万，心衰890万，肺源性心脏病500万，房颤487万，风湿性心脏病250万，先天性心脏病200万，下肢动脉疾病4530万，高血压2.45亿。中国高血压防治指南(2018年修订版)指出2012-2015年我国18岁及以上人口的高血压患病粗率为27.90％，标化率为23.2％，高血压患者中，只有约一半人知道自己有高血压这个问题，把血压控制好的却只有16.8％。高血压是全球心血管疾病和全因死亡的主要可改变危险因素，79.8％的脑卒中与高血压有关，控制血压在正常水平可减少40-50％脑卒中的发生。因此，控制高血压可有效降低心血管疾病死亡率。

目前高血压用药种类繁多，而人群药物代谢基因也具有多态性，同一种药物用于不同人的敏感性和代谢速度各有不同。综合分析，高血压控制率低，除了患者服药依从性差，饮食及生活方式等未改善，未根据基因多态性进行个性化用药也是重要影响因素。多数患者在指南标准药物治疗方案下规律治疗，其疾病的控制率和缓解率依然很低，由于患者个体基因差异会造成药物代谢能力不同，对同一药物的反应也有很大差别。医生通常需要让患者“试药”三到六个月才能筛选出适合的药物，在此过程中，大多数人会中断甚至放弃治疗。2017年，卫计委合理用药专家委员会及中国医师协会高血压专业委员会发布《高血压合理用药指南(第2版)》，明确提出：不同个体对药物反应差异巨大，高血压用药时应考虑药物基因组学因素。通过基因检测来判断药物代谢酶和受体的基因变异情况，从而选择合适的降压药物和用药剂量，达到降低不良反应、减少无效用药、个体化精准用药的目的。

尽管现有技术中已有针对高血压个体化用药相关的检测，但不同检测方法侧重不同，难以满足临床实际需求。高通量测序技术虽通量大，但实验过程和数据分析周期长，对实验操作和数据分析人员的技术要求门槛高；荧光定量PCR技术平台实验周期短，但通量小，一个反应孔只能实现5重左右靶标的分析，如武汉友芝友医疗科技股份有限公司的“人类AGTR1、ACE、ADRB1、CYP2D6、CYP2C9基因检测试剂盒(PCR-荧光探针法)”仅能检测5个基因；基因芯片平台操作简便、快速，但通量小、灵敏度低，成本相对较高；一代测序sanger技术一个反应孔只能检测1个SNP位点，虽然准确但实验成本高。MassARRAY核酸质谱分析技术一次检测实验能够得到多样本的30重乃至更多SNP位点信息，实验周期只需1天左右，拥有检测多重、准确、高通量、高灵敏度一级快速出报告等优势，适合大样本及多位点的基因检测。