[发明专利]用于污染农田治理的含多价噬菌体土壤修复剂及制备方法

说明书

本发明公开了用于污染农田治理的含多价噬菌体土壤修复剂及制备方法，属于土壤修复技术领域，用于污染农田治理的含多价噬菌体土壤修复剂，所述修复剂由以下重量份的成分组成：10‑15份多价噬菌体YSZ1R原液和13‑20份多价噬菌体YSZ5K原液、7‑9份脱氧核苷酸溶液、10‑15份玉米芯渣、8‑12份大豆秸秆根渣、11‑13份动物油脂、4‑7份琼脂块、4‑9份葡萄糖、5‑7份氨基酸溶液、7‑13份无机盐溶液；土壤修复剂的制备方法包括：S1、制备多价噬菌体原液；S2、制备营养液；S3、多价噬菌体的转移；本发明通过噬菌体对病菌进行消除，大量的噬菌体在杀死病菌后，会自然消亡，不会对土壤造成新的污染。

技术领域

本发明涉及土壤修复技术领域，具体是涉及用于污染农田治理的含多价噬菌体土壤修复剂及制备方法。

背景技术

由于我国现阶段畜禽粪便安全化处理技术或环境管理仍存在一定的不足或缺失，许多城郊畜牧业养殖厂周边的农田土壤常成为残留和滋生人畜共患抗性细菌的高风险热点区域，严重影响人体健康和环境安全。因而，针对抗性细菌污染农田土壤，开展必要的微生物修复技术研究非常迫切。

噬菌体疗法为修复上述污染土壤提供了一种全新途径。细菌噬菌体是一类较为专属捕食活体宿主细菌而存活的生物体，在土壤、水、空气乃至人/动物体表或肠道内均广泛分布了大量噬菌体，据估算其总量达到10³¹数量级。噬菌体疗法是指通过分离、筛选、纯化和富集宿主细菌的专属噬菌体之后，向污染土壤中添加特定噬菌体菌液，定向侵染灭活抗性细菌的修复方式。国外学者已成功将噬菌体疗法应用在灭活辣椒、番茄、葡萄等果蔬的植物病害细菌或人畜共患抗性细菌的食品安全保障领域。然而，使用噬菌体疗法来削减土壤中抗性细菌的生物修复技术研究则相对较少。此外，现有研究常认为噬菌体仅限于侵染某一“种”类的宿主细菌，而近年来学术界发现：一些噬菌体经过适当的基因改造或人工加速其宽宿主谱的表达，可针对同一“属”内几种高度同源性的宿主细菌，甚至针对不同种属之间的宿主细菌也具有一定广谱性捕食区间。这为噬菌体疗法广泛应用提供了有效地理论支撑。

通过农药对污染土壤中病菌进行修复，在修复污染土壤后，土壤内会残留大量农药，成为新的土壤污染源，而且农药在清除病菌的同时，还会杀死大量土壤中有益的微生菌，破坏土壤微生物生态环境，因此需要一种安全可靠的土壤修复剂，且不会对土壤造成新的污染。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了用于污染农田治理的含多价噬菌体土壤修复剂及制备方法。

本发明的技术方案是：用于污染农田治理的含多价噬菌体土壤修复剂，所述修复剂由以下重量份的成分组成：10-15份多价噬菌体YSZ1R原液和13-20份多价噬菌体YSZ5K原液、7-9份脱氧核苷酸溶液、10-15份玉米芯渣、8-12份大豆秸秆根渣、11-13份动物油脂、4-7份琼脂块、4-9份葡萄糖、5-7份氨基酸溶液、7-13份无机盐溶液；

所述玉米芯渣的粒度为2-5mm，所述大豆秸秆根渣的粒度为1-2mm，所述葡萄糖粉的粒度为80-100μm，琼脂块的粒度为5-10cm。

进一步地，上述的用于污染农田治理的含多价噬菌体土壤修复剂的制备方法，包括以下步骤：

S1、制备多价噬菌体原液：

将多价噬菌体YSZ1R与LB培养液按质量比1:1混合，得到混合液A，多价噬菌体YSZ5K与LB培养液按质量比1:1混合，得到混合液B，将混合液A和混合液B分别在25-35℃下摇床培养8-12h后，得到多价噬菌体YSZ1R原液和多价噬菌体YSZ5K原液；

S2、制备营养液：

按上述重量份取动物油脂玉米芯渣、大豆秸秆根渣、琼脂块加入至混料器中，混料器混料温度为80-100℃，混料过程中按上述重量份的成分加入无机盐溶液，搅拌持续1-2h，待各物料混合均匀后，降低混料器温度至25-30℃，按上述重量份的成分加入葡糖糖、氨基酸液、脱氧核苷酸溶液，再持续搅拌30-40min后得到营养液；