[发明专利]一株苏云金芽孢杆菌NSHZ-14及其应用

说明书

本发明公开了一株苏云金芽孢杆菌NSHZ‑14及其应用，属于微生物技术领域。本发明的苏云金芽孢杆菌NSHZ‑14，分类命名为Bacillus thuringiensis NSHZ‑14，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC：M20222105，保藏日期：2022年12月30日，保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内。本发明的苏云金芽孢杆菌NSHZ‑14，为火炬松内生细菌，其细菌培养滤液具有很强的杀线作用，细菌培养滤液处理线虫72h后，NSHZ‑14的拮抗活性最强，线虫的校正击倒率达到99.49％，可见该苏云金芽孢杆菌NSHZ‑14在杀线方面将具有很好的应用前景，具有很好生防作用。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，更具体地说，涉及一株苏云金芽孢杆菌NSHZ-14及其应用。

背景技术

目前针对松材线虫的生防研究主要集中在杀线植物、真菌和放线菌等几类因子上，而有关细菌用作松材线虫生防因子的报道较少，植物内生细菌对松材线虫的生防研究更是极少。利用内生细菌防治植物病害一直是国内外的研究热点。以前绝大多数植物病害生防菌是从土壤或植物根际土壤微生物中分离筛选得到的。但由于这些土壤微生物易受外界条件的影响，并难于在与土壤、植物根际或叶围习居微生物的竞争中长期占优势，因而极大地影响了其实用价值(李长松，1992)。而植物内生细菌作为生防因子有很多优点：它们分布于植物的不同组织中，有充足的营养物质，同时受到植物组织的保护，不受外部恶劣环境如强烈日光、紫外线风雨等的影响，具有稳定的生态环境(易有金等，2007)。因此，内生细菌相对于其它细菌更易发挥生防作用。利用内生细菌防治植物真菌和细菌病害的研究很多，而在防治线虫病害方面研究的很少。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的技术问题在于提供一株苏云金芽孢杆菌NSHZ-14，满足使用需求。本发明所要解决的另一技术问题在于提供一株苏云金芽孢杆菌NSHZ-14的应用。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：

一株苏云金芽孢杆菌NSHZ-14，分类命名为Bacillus thuringiensis NSHZ-14，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC：M 20222105，保藏日期：2022年12月30日，保藏地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内。

苏云金芽孢杆菌NSHZ-14在杀松材线虫中的应用。

苏云金芽孢杆菌NSHZ-14的细菌培养滤液在杀松材线虫中的应用。

苏云金芽孢杆菌NSHZ-14的细菌培养滤液在杀松材线虫中的应用，其特征在于，所述的苏云金芽孢杆菌NSHZ-14的细菌培养滤液的制备方法为：在NA培养基上划线接种活化，30℃恒温培养箱中恒温培养24h；用接种环挑取一环活化好的苏云金芽孢杆菌NSHZ-14接种于已灭菌的30mLNB培养基中，30℃，200r/min条件下摇培7d，将摇培液4℃条件下11000rpm离心10min，用滤膜孔径为0.22μm的细菌抽滤器抽滤制备获得苏云金芽孢杆菌NSHZ-14培养滤液。

相比于现有技术，本发明的有益效果为：

本发明的苏云金芽孢杆菌NSHZ-14，为火炬松内生细菌，其细菌培养滤液具有很强的杀线作用，细菌培养滤液处理线虫72h后，NSHZ-14的拮抗活性最强，线虫的校正击倒率达到99.49％，可见该苏云金芽孢杆菌NSHZ-14在杀线方面将具有很好的应用前景，具有很好生防作用。

附图说明

图1为四株内生细菌培养时间与培养滤液48h杀线活性之间的关系图；

图2为依据16SrDNA基因序列构建的NSHZ-14菌株的系统发育树图；

图3为菌株NSHZ-14的Biolog鉴定结果图。

具体实施方式