[发明专利]一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针及其合成方法和应用

权利要求书

1.一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针，其特征在于，荧光探针包括如下所示的结构：

2.根据权利要求1所述的一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针，其特征在于，荧光探针以荧光基团三苯胺TPA为母体通过化学合成反应连接硝基还原酶识别基团和线粒体靶向基团。

3.根据权利要求1所述的一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针，其特征在于，硝基还原酶识别基团为对硝基苄溴，线粒体靶向基团为4-丁羧基三苯基膦。

4.一种如权利要求1-3任意一项所述基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针的合成方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

S1、将4-溴苯酰氯和噻吩在氯化铝催化下发生Friedels-Crafts反应制得中间物1；

S2、采用Suzuki偶联方法，以金属钯配合物为催化剂在碱性环境中以中间物2和中间物1为反应物，四氢呋喃和水为溶剂，制得中间物3；

S3、通过克脑文盖尔缩合(KnoevenagelCondensation)反应，将中间物3与丙二腈在四氯化钛作用下生成中间物4；

S4、将中间物4和三溴化硼反应，将甲氧基水解得到含有两个羟基的中间物5；

S5、将中间物5和对硝基苄溴在反应，得到对硝基苄基单取代的中间物6；

S6、将中间物6与化合物f在含有碱溶剂中通过亲核取代反应制得荧光探针；

其中中间物1、中间物2、中间物3、中间物4、中间物5和中间物6的结构式分别为：

化合物f结构式为

5.根据权利要求4所述一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤S2中金属钯配合物为四(三苯基膦)钯。

6.根据权利要求4所述一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤S3中中间物3与丙二腈的摩尔比为1：(8-15)。

7.根据权利要求4所述一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤S4中中间物4和三溴化硼的摩尔比为1：(2-5)。

8.根据权利要求4所述一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤S5反应过程加入缚酸剂。

9.根据权利要求4所述一种基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤S6中间物6与中间物f的摩尔比为1：(1.1-1.5)。

10.一种如权利要求1所述基于三苯胺衍生物线粒体靶向硝基还原酶响应荧光探针在监测和跟踪活细胞中线粒体动态运动中的应用。