[发明专利]一种盐酸小檗碱磷脂复合物的复合率检测方法及其应用

说明书

本发明公开了一种盐酸小檗碱磷脂复合物的复合率检测方法及其应用，能够稳定准确检测出盐酸小檗碱磷脂复合物的复合率，尤其是适合盐酸小檗碱和其他活性成分共复合的磷脂复合物的复合率。

技术领域

本发明涉及一种磷脂复合物的检测方法，具体涉及一种盐酸小檗碱磷脂复合物的复合率检测方法。

背景技术

口服盐酸小檗碱吸收利用率差，口服吸收量仅有5％，因此现有技术中将盐酸小檗碱磷脂复合形成复合物。研究表明，盐酸小檗碱-磷脂复合物可以增加盐酸小檗碱的生物利用度。但盐酸小檗碱-磷脂复合物的复合率偏低，将盐酸小檗碱、其他活性成分(例如水飞蓟宾)磷脂共同复合，形成复合物(例如盐酸小檗碱-水飞蓟宾-磷脂复合物)，能够提高复合物的复合效果、活性和生物利用度。

在对盐酸小檗碱磷脂复合物进行研究和制备工艺优化中，需要一种可靠的盐酸小檗碱磷脂复合物的复合率检测方法，尤其是一种可靠的盐酸小檗碱-其他活性成分-磷脂复合物的复合率检测方法。

但是，常规的测试磷脂复合物复合率的方法误差大，例如减重法，大大影响了测试的准确性。有报道，将盐酸小檗碱和磷脂复合，得到盐酸小檗碱-磷脂复合物，并以盐酸小檗碱-磷脂复合率为评价指标。使用的复合率检测方法：利用盐酸小檗碱不溶于1，4-二氧六环，而磷脂和盐酸小檗碱磷脂复合物易溶于二氧六环，从而通过干燥称重的方法来计算复合率：盐酸小檗碱-磷脂的复合率(％)＝(W1-WD)/W1*100％其中，W1为盐酸小檗碱的初始投药量，WD为沉淀量。

但这个方法存在两个缺点，一方面，面对检测盐酸小檗碱磷脂复合物(该复合物没有复合其他活性成分)的时候，复合率的结果和沉淀物的称量结果息息相关，但是实验过程中的误差比较大，导致结果上下波动很大；另一方面，面对检测盐酸小檗碱-其他活性成分-磷脂复合物的复合率的时候，由于盐酸小檗碱、磷脂复合物和更多成分一起复合时，因为更多成分的加入，导致不溶物的物质不纯，使得盐酸小檗碱的复合率计算就不能再根据1，4-二氧六环溶剂中的不溶物来计算复合率。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足之处，提供一种盐酸小檗碱磷脂复合物的复合率检测方法：

称取复合物于比色管中，加入1，4-二氧六环涡旋混匀，超声，静置30min，过滤得到滤液，甲醇稀释后高效液相测试，得到溶解在1，4-二氧六环溶剂中的盐酸小檗碱含量；

称取复合物于比色管中，加入甲醇涡旋混匀，超声，静置30min，过滤得到滤液，甲醇稀释后高效液相测试，得到溶解在甲醇中的盐酸小檗碱的含量；

盐酸小檗碱在磷脂复合物中复合率的计算公式：

盐酸小檗碱-磷脂的复合率(％)＝W1/W2*100％

其中，W1为溶解在1，4-二氧六环溶剂中的盐酸小檗碱含量；W2为溶解在甲醇中的盐酸小檗碱的含量。

进一步的，两次称取的复合物的用量相同；复合物用量在0.1-1g，例如0.5g(精确至0.1mg)。

进一步的，涡旋混匀前加入的1，4-二氧六环的用量在10-100ml，例如40ml。

进一步的，涡旋混匀前加入的甲醇的用量在10-100ml，例如40ml。

进一步的，超声时间为5min-2h，优选的，30min。

进一步的，超声温度为常温。

进一步的，过滤条件为0.1-1μm，优选的经0.45μm。

进一步的，高效液相色谱洗脱流动相：A：乙腈，B：0.1％磷酸溶液。

进一步的，高效液相色谱参数：

色谱柱：Poreshell 120SB-C18(4.6mm*250mm，4um)