[发明专利]du1突变体及其编码基因、检测引物组合及应用在审
申请号: | 202310329973.9 | 申请日: | 2023-03-30 |
公开(公告)号: | CN116555468A | 公开(公告)日: | 2023-08-08 |
发明(设计)人: | 骆美洁;赵久然;卢柏山;史亚兴;赵衍鑫;刘俊玲 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 孙怡 |
地址: | 100097 北京市海淀区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | du1 突变体 及其 编码 基因 检测 引物 组合 应用 | ||
1.一种du1基因突变体,其特征在于,具有如SEQ ID No:1-3依次连接所示的核苷酸序列。
2.一种du1蛋白突变体,其特征在于,具有如SEQ ID No:4所示的氨基酸序列。
3.一种用于检测du1基因突变体的KASP引物组合,其特征在于,包括两条特异性引物和两条通用引物,其中,所述特异性引物的序列如SEQ ID NO.5-6所示,所述通用引物的序列如SEQ ID NO.7-8所示;两条所述特异性引物分别标记有产生不同荧光色的荧光报告基团;du1基因突变体具有如SEQ ID No:1-3依次连接所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的KASP引物组合,其特征在于,所述荧光报告基团为FAM、HEX、JOE、TET、CY3、CY5、ROX、Texas中的任一种。
5.用于检测du1基因突变体的检测试剂或试剂盒,其特征在于,包含权利要求3或4所述的KASP引物组合;du1基因突变体具有如SEQ ID No:1-3依次连接所示的核苷酸序列。
6.一种用于检测玉米的方法,其特征在于,以待测玉米样品的基因组DNA为检测模板,利用KASP引物组合进行PCR检测,所述KASP引物组合如权利要求3或4所述;
若只检测到如SEQ ID NO.5所示特异性引物携带的荧光信号,则判定所述待测玉米样品在du1基因的第2474bp之后含有5839bp的插入突变,待测玉米为du1基因突变型玉米,含糖量高于普通玉米自交系和糯玉米自交系;
若只检测到如SEQ ID NO.6所示特异性引物携带的荧光信号,则判定所述待测玉米样品在du1基因的第2474bp之后不含有5839bp的插入突变,待测玉米为Du1基因野生型玉米;
若同时检测到如SEQ ID NO.5-6所示特异性引物携带的荧光信号,则判定所述待测玉米样品为Du1du1基因杂合型玉米。
7.du1蛋白突变体或其编码基因、或含有其编码基因的生物材料、或权利要求3或4所述的KASP引物组合、或权利要求5所述的检测试剂或试剂盒、或权利要求6所述的方法在鉴别玉米甜度、玉米种质资源鉴定、改良或分子标记辅助育种中的应用;所述du1突变体蛋白具有如SEQ ID No:4所示的氨基酸序列。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述生物材料为表达盒、载体、宿主细胞或重组菌。
9.根据权利要求7或8所述的应用,其特征在于,所述编码基因具有如SEQ ID No:1-3依次连接所示的核苷酸序列。
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