[发明专利]一株新美鞭菌LGM-ZA14及其在制备降解抗营养因子香豆素的菌剂中的应用

说明书

本发明公开了一株新美鞭菌LGM‑ZA14及其在制备降解抗营养因子香豆素的菌剂中的应用。所述的新美鞭菌LGM‑ZA14分类命名为新美鞭菌Neocallimastix sp.，保藏编号为CGMCC No.17594。所述新美鞭菌LGM‑ZA14的发酵菌液能够用于降解抗营养因子香豆素，且使用方法简单，只需将含有香豆素的待降解物与发酵液混合后杀菌，再加入发酵菌液厌氧发酵即可降解香豆素，该制备方法工艺程序简单、可操作性强，可显著降低香豆素的含量，为草木樨作为优质饲草饲喂反刍动物提供新的方法。

技术领域

本发明属于生物领域，具体涉及一株新美鞭菌LGM-ZA14及其在制备降解抗营养因子香豆素的菌剂中的应用。

背景技术

草木樨是我国广泛种植的一种豆科植物，其粗蛋白含量很高，营养价值比肩苜蓿，且对干旱、寒冷和高盐度等极端环境的耐受力强，但由于抗营养因子香豆素的存在，草木樨尚未广泛用作反刍动物饲草。香豆素是一种来源于苯丙烷生物合成途径的植物次生代谢物，在储存不当的条件下会转变成双香豆素，引起反刍动物中毒，因此如何合理利用草木樨是一个亟待解决的问题。

植物次级代谢物是存在于植物内的天然化合物，这类物质具有毒性或抗营养效应，从而抵御草食动物的采食行为。在反刍动物的长期进化过程中，由于瘤胃微生物具有解毒作用，其对有毒的植物次级代谢物具有更强的耐受性。而如果能使用厌氧真菌对草木樨进行预处理，降低其香豆素含量，会是一种有效的处理手段，但如何提高该方法降解草木樨中香豆素的效率以及能够选择哪种合适的菌株都是需要解决的问题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一株新美鞭菌LGM-ZA14及其在制备降解抗营养因子香豆素的菌剂中的应用，利用所述新美鞭菌LGM-ZA14发酵液降解香豆素的方法操作简单，且降解效率高。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明提供了一株新美鞭菌LGM-ZA14，其分类命名为新美鞭菌Neocallimastixsp.，保藏编号为CGMCC No.17594。

进一步的，所述新美鞭菌LGM-ZA14的最适生长温度为39℃，适合生长pH为6.6-7.2。

进一步的，所述新美鞭菌LGM-ZA14的前24h为生长迟缓期，随后进入对数生长期，待培养至72h时达到对数生长末期，96h为生长稳定期。

本发明还提供了包含所述的新美鞭菌LGM-ZA14的发酵菌液，所述发酵菌液的制备方法为将新美鞭菌LGM-ZA14于发酵液中39℃培养72h，得到发酵菌液。

进一步的，所述发酵液包括基础培养基、含有微量元素的缓冲液、无细胞瘤胃液、底物、氧化还原剂和氧化还原指示剂。

本发明还提供了所述新美鞭菌LGM-ZA14或其发酵菌液在制备降解抗营养因子香豆素的菌剂中的应用。

进一步的，所述发酵菌液降解抗营养因子香豆素的具体步骤为：

(1)将含有香豆素的待降解物与发酵液混合后杀菌，得到发酵物溶液；

(2)将发酵物溶液加入发酵菌液，38-41℃厌氧发酵72-196h，得到低香豆素含量的产物。

进一步的，所述发酵菌液中新美鞭菌LGM-ZA14的含菌量为2.0×10⁶～2.0×10⁷个/mL。

进一步的，所述步骤(2)中发酵菌液与发酵物溶液的质量比为1：5～80。

进一步的，所述步骤(2)中厌氧发酵降解香豆素的最优条件为39℃厌氧发酵168h。

进一步的，所述发酵物溶液中香豆素含量为2.0-4.0mM时，发酵菌液降解香豆素的效率较高。