[发明专利]一种促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白-干细胞制剂

说明书

本发明公开了一种促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白‑干细胞制剂；是将传代3‑5代的脂肪间充质干细胞置于胶原蛋白培养液中，于37℃、5％CO₂培养至少5天；培养完成后得到胶原蛋白‑干细胞制剂；所述的胶原蛋白培养液是10％FBSα‑MEM培养液与胶原蛋白液以1：1体积比例混合，经超声至液态并灭菌而得。本发明提供促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白‑干细胞制剂，经皮肤愈合实验表明添加胶原蛋白的间充质干细胞可以缩短糖尿病犬的伤口愈合时间，促进犬类皮肤损伤的修复。

技术领域

本发明属于干细胞技术领域，涉及一种促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白-干细胞制剂。

背景技术

皮肤是保护机体免受外界病原体侵害的第一道屏障，并且具有调节体温、控制排泄和合成维生素D等必要功能。当皮肤的完整性遭到破坏时，创面即刻启动一系列复杂且高度协调的修复措施以促进损伤部位组织的愈合，在此期间创面容易受到多种因素干扰，导致伤口难以愈合，甚至丧失基本功能。创面的治疗需要特定的医疗技术，有些甚至需要长期治疗，这就构成了当代医学的一个巨大挑战。随着宠物市场的扩大，犬猫等宠物和人类皮肤伤口愈合问题愈加严重。

糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)已经成为伴侣动物中常见的自发性复杂的代谢性内分泌疾病之一，有调研指出在犬和猫中患病率估计为0.26～1.33％。糖尿病所造成的伤口溃烂愈合难度高，易感染，这不仅可能延迟伤口愈合过程，还可能导致受影响患者的肢体截肢甚至更为严重的后果。使用不同的敷料，例如纱布、薄膜和组织工程皮肤替代物是目前的常规治疗方法，负压伤口治疗、自体皮肤移植物和高压氧伤口治疗也是有效的治疗手段。但是，这些方法有成本高、不能及时移除失活的组织和外科清创、氧中毒等限制性。为了规避传统方法的局限性，应用干细胞已成为一种很有前途的方法。

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白-干细胞制剂，通过干细胞技术克服糖尿病宠物皮肤损伤愈合困难，促进糖尿病犬皮肤损伤修复。

本发明是通过以下技术方案来实现：

一种促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白-干细胞制剂，是将传代3-5代的脂肪间充质干细胞置于胶原蛋白培养液中，于37℃、5％CO₂培养至少5天；培养完成后得到胶原蛋白-干细胞制剂；

所述的胶原蛋白培养液是10％FBSα-MEM培养液与胶原蛋白液以1：1体积比例混合，经超声至液态并灭菌而得。

一种促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白-干细胞制剂的制备方法，包括以下操作：

1)用配置0.1M醋酸溶解胶原蛋白，室温搅拌至胶原蛋白完全溶解，得到胶原蛋白溶液；

2)取无菌玻璃瓶，在瓶底部铺上一层氯仿，将胶原蛋白溶液转移到氯仿上层，氯仿体积为胶原蛋白溶液的10％，不能震荡或搅拌；2-8℃静置过夜；无菌操作下将上层胶原蛋白溶液转移至无菌容器中，得到胶原蛋白原液；

3)将胶原蛋白原液的酸中和后，得到胶原蛋白液；

4)将10％FBSα-MEM培养液与胶原蛋白液以1：1体积比例混合，并超声至液态，得到胶原蛋白培养液；然后送去辐照灭菌；

5)将传代3-5代的脂肪间充质干细胞置于胶原蛋白培养液中，于37℃、5％CO₂培养至少5天；培养完成后得到胶原蛋白-干细胞制剂。

所述的促进糖尿病宠物皮肤创伤修复的胶原蛋白-干细胞制剂在制备宠物皮肤创伤修复药物或制剂中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：