[发明专利]一株新美鞭菌LGM-ZA13及其在制备降解香豆素的草木樨饲草添加剂中的应用

说明书

本发明公开了一株新美鞭菌LGM‑ZA13及其在制备降解香豆素的草木樨饲草添加剂中的应用。所述的新美鞭菌LGM‑ZA13分类命名为新美鞭菌Neocallimastix sp.，保藏编号为CGMCC No.17593。所述新美鞭菌LGM‑ZA13的发酵菌液可以用于草木樨饲草中降解抗营养因子香豆素，且使用方法简单，只需将草木樨与发酵液混合后杀菌，再加入发酵菌液厌氧发酵即可获得低香豆素含量的草木樨，该制备方法工艺程序简单、可操作性强，可显著降低香豆素的含量，为草木樨作为优质饲草饲喂反刍动物提供新的方法。

技术领域

本发明属于生物领域，具体涉及一株新美鞭菌LGM-ZA13及其在制备降解香豆素的草木樨饲草添加剂中的应用。

背景技术

优质饲草能有效替代牛羊饲粮中粮食作物的比例，缓解“人畜争粮”，但我国优质饲草如苜蓿资源不足，需要大量进口。因此，如何合理开发国内非常规饲草资源至关重要。我国草木樨(Melilotus)俗称甜三叶、野苜蓿，属于豆科草本植物。草木樨种子产量高，与大多数其他牧草相比，对干旱、寒冷和高盐度等极端环境的耐受力强，因此在全世界各地均有引种。作为豆科牧草，草木樨能与多种细菌进行共生固氮，因此其固氮率高于其他豆科植物，有利于作物轮作。因其产量大、抗逆性强，且养分含量仅次于紫花苜蓿(Medicagosativa)，草木樨是一种良好的饲用牧草。

目前，由于抗营养因子香豆素的存在，草木樨尚未广泛用作反刍动物饲草。香豆素是一种来源于苯丙烷生物合成途径的植物次生代谢物，在储存不当的条件下会转变成双香豆素，引起反刍动物中毒，因此如何合理利用草木樨是一个亟待解决的问题。瘤胃是一个小型的生态系统，其中栖息着数以亿计的微生物，包括细菌、真菌、原虫、古菌和噬菌体等几大类。并且瘤胃厌氧真菌可能对特定的酚类物质有解毒作用，如果能使用厌氧真菌对草木樨进行预处理，降低其香豆素含量，会是一种有效的处理手段，但如何提高该方法降解草木樨中香豆素的效率以及能够选择哪种合适的菌株都是需要解决的问题。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一株新美鞭菌LGM-ZA13及其在制备降解香豆素的草木樨饲草添加剂中的应用，利用新美鞭菌LGM-ZA13发酵菌液降解草木樨中香豆素的方法操作简单，且降解效率高。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明提供了一株新美鞭菌LGM-ZA13，其分类命名为新美鞭菌Neocallimastixsp.，保藏编号为CGMCC No.17593。

进一步的，所述新美鞭菌LGM-ZA13的最适生长温度为39℃，适合生长pH为6.5-7.2。

进一步的，所述新美鞭菌LGM-ZA13能分泌乙酰木聚糖酯酶。

本发明还提供了包含所述的新美鞭菌LGM-ZA13的发酵菌液。

进一步的，所述发酵菌液由新美鞭菌LGM-ZA13接种到发酵液中经37-41℃培养72h以上制得，所述发酵液包括基础培养基、含有微量元素的缓冲液、无细胞瘤胃液、底物、氧化还原剂和氧化还原指示剂。

本发明还提供了所述新美鞭菌LGM-ZA13或其发酵菌液在制备降解香豆素的草木樨饲草添加剂中的应用。

进一步的，所述发酵菌液用于降解草木樨饲草中香豆素的具体步骤为：

(1)将新鲜草木樨切碎至0.3cm～0.5cm的片段，将其加入到厌氧反应器中作为发酵物，再以1：80～100的质量比加入发酵液，混合后杀菌，得到发酵物溶液；

(2)向所述发酵物溶液加入发酵菌液，38-41℃厌氧发酵72-196h，得到低香豆素含量的草木樨。

进一步的，所述步骤(2)中发酵菌液中新美鞭菌LGM-ZA13的含菌量为