[发明专利]引物，试剂盒和检测方法及其应用

权利要求书

1.引物，其特征在于，所述引物包括检测CD16A基因rs396991位点多态性的第一引物组；

所述第一引物组包括：

CD16A-158F：5’-acagcggctcctacttctgcagggggcttt-3’(SEQ ID NO:1)，

CD16A-158V：5’-tctctgaagacacatttttactcccaac-3’(SEQ ID NO:2)，

所述CD16A-158F和所述CD16A-158V中，在靠近3’端的5个碱基内除第一个碱基外引入至少1个错配碱基。

2.根据权利要求1所述的引物，其中，引入错配碱基的位点不相邻。

3.根据权利要求1所述的引物，其中，所述第一引物组包括：

CD16A-158F：5’-acagcggctcctacttctgcagggggcv₁tt-3’(SEQ ID NO:3)，

CD16A-158V：5’-tctctgaagacacatttttactcd₁cb₁ac-3’(SEQ ID NO:4)和/或5’-tctctgaagacacatttttactcccb₂ac-3’(SEQ ID NO:5)，

其中，所述v₁为a、c或g中的至少一种；所述b₁为t、c或g中的至少一种；所述d₁为a、t或g中的至少一种；所述b₂为t、c或g中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的引物，其中，所述第一引物组包括：

CD16A-158F-F1：5’-acagcggctcctacttctgcagggggcCtt-3’(SEQ ID NO:6)，

CD16A-158V-R1：5’-gtctctgaagacacatttttactcTcGac-3’(SEQ ID NO:7)；和/或

CD16A-158V-R1’：5’-tctctgaagacacatttttactcccCac-3’(SEQ ID NO:8)。

5.根据权利要求1-4任一项所述的引物，其中，所述引物还包括扩增含rs396991位点的CD16A基因序列的第二引物对，所述第二引物对包括正向引物和反向引物；所述正向引物与rs396991位点的距离不等于所述反向引物与rs396991位点的距离；

所述第二引物对包括：

CD16A-F1：5’-gagaataagctctggcgatac-3’(SEQ ID NO:9)，

CD16A-R1：5’-gcacctcggttacttcatctgta-3’(SEQ ID NO:10)；和/或，

CD16A-F2：5’-gagaataagctctggcgatac-3’(SEQ ID NO:9)，

CD16A-R2：5’-ctttgatgtgaccttagggaaact-3’(SEQ ID NO:11)；和/或，

CD16Ar-F3：5’-gccaccgtcaccttattcct-3’(SEQ ID NO:12)，

CD16A-R3：5’-ttgcaggttccacacacagg-3’(SEQ ID NO:13)；和/或，

CD16A-F4：5’-ggtcttggtatgacttcagttc-3’(SEQ ID NO:14)，

CD16A-R4：5’-ttgcaggttccacacacagg-3’(SEQ ID NO:13)。

6.根据权利要求5所述的引物，其中，所述第二引物对包括：

CD16A-F1：5’-gagaataagctctggcgatac-3’(SEQ ID NO:9)和

CD16A-R1：5’-gcacctcggttacttcatctgta-3’(SEQ ID NO:10)。

7.权利要求1-6中任一项所述的引物在检测CD16A基因rs396991位点多态性中的应用。