[发明专利]一种Bst DNA聚合酶活性的检测方法及其试剂盒在审
| 申请号： | 202310357964.0 | 申请日： | 2023-04-06 |
| 公开（公告）号： | CN116218952A | 公开（公告）日： | 2023-06-06 |
| 发明（设计）人： | 马耀争;晋莲;钟芳林;潘超;杨小岚;蒋如飞 | 申请（专利权）人： | 武汉纳磁生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/48 | 分类号： | C12Q1/48;C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 武汉臻诚专利代理事务所(普通合伙) 42233 | 代理人： | 胡星驰 |
| 地址： | 430200 湖北省武汉市东湖新技术*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 bst dna 聚合 活性 检测 方法 及其 试剂盒 | ||
1.一种Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
利用Bst DNA聚合酶进行等温扩增，绘制Bst DNA聚合酶标准品酶量与扩增产物双链DNA对应的扩增曲线线性增长期内单位时间最大荧光增量的标准曲线，通过检测Bst DNA聚合酶待测样品扩增产物在线性增长期内单位时间最大荧光增量，根据标准曲线计算待测样品的酶活。
2.如权利要求1所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，所述单位时间为等温扩增反应单次循环所需的时间。
3.如权利要求2所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，所述等温扩增，扩增引物为一组等温扩增引物。
4.如权利要求3所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，所述扩增引物，包括但不局限于如SEQ ID No.1-6所示序列在内的所有常规等温扩增引物组。
5.如权利要求4所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，所述扩增引物，序列如SEQ ID No.1-6所示。
6.如权利要求3所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，所述等温扩增，其模板双链环状质粒DNA，包括但不局限于如SEQ ID No.7所示序列在内的所有对应如权利要求4中常规等温扩增引物组中任一组引物组的产物或模板序列。
7.如权利要求6所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，所述等温扩增，其模板双链环状质粒DNA如SEQ ID No.7所示序列。
8.如权利要求1所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，所述最大荧光增量采用荧光染料法实时荧光定量扩增获得。
9.如权利要求8所述的Bst DNA聚合酶活性检测方法，其特征在于，扩增反应条件为65℃，15～60秒，60个循环；85℃，5分钟。
10.一种如权利要求1至9任意一项所述的Bst DNA聚合酶活性检测试剂盒，其特征在于，包括酶浓度在5～80U/μL的Bst DNA聚合酶标准品。
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