[发明专利]检测白对虾病原物的试剂、试剂盒与方法

权利要求书

1.一种检测白对虾病原物的试剂，其特征在于，所述试剂包括引物混合液，所述引物混合液包括以下引物组：

检测传染性皮下及造血组织坏死病毒引物组：

SEQ ID No.1为上游外部引物：CAATATAAAGACAAACTCAGAGGAA；

SEQ ID No.2为下游外部引物：TGCTTTAAGGTTTACAGTGTT；

SEQ ID No.3为上游内部引物：CGCATTTTTCTGTACCTGTTTTGTTGAATACATTCATACAAAGTTACCAG；

SEQ ID No.4为下游内部引物：GCAGAGTGTTGTTAAGGGTTTAAGTTGAAATTGTATTTGACCAATGGT；

检测桃粒病毒引物组：

SEQ ID No.5为上游外部引物：TGCATTGAATCGAAGCAC；

SEQ ID No.6为下游外部引物：AGCCGCAAAAATACCCAA；

SEQ ID No.7为上游内部引物：CCACGTCTGTTTTCCGCTCTT-GTCAGCAGGTTTTCCCTA；

SEQ ID No.8为下游内部引物：GCTCTGAGGAATTCATTGTTGACAA-TCCACTATGCCATCTTTGG；

检测偷死野田村病毒引物组：

SEQ ID No.9为上游外部引物：GCCAAAGATGGCATAGTGG；

SEQ ID No.10为下游外部引物：TCCTGTTCGTCATCACTTG；

SEQ ID No.11为上游内部引物：TACTTTCTCCAATGGGCGCC-TGTTAGTTTGGGTATTTTTGCG；

SEQ ID No.12为下游内部引物：CAGGCCAATAAGACACGTGTGT-CCAAGAAACTTAGGTAATATCTTCT；

检测对虾传染性肌肉坏死病毒引物组：

SEQ ID No.13为上游外部引物：CCTGGACCTATCATACATAGC；

SEQ ID No.14为下游外部引物：CCAATGTTGTGAAAAATAAGCT；

SEQ ID No.15为上游内部引物：CCGGGGATGATGTAGTATTGAAAGT-GTTGCATTTGCAAGAACTGG；

SEQ ID No.16为下游内部引物：TAGACTGCAAGTACAAATGTCATCC-CATGTTGTACCACCTGCTG。

2.如权利要求1所述的检测白对虾病原物的试剂，其特征在于，所述引物混合液中，以摩尔比计，总上游外部引物0.5～3份、总下游外部引物0.5～3份、总上游内部引物5～10份、总下游内部引物5～10份。

3.如权利要求1所述的检测白对虾病原物的试剂，其特征在于，所述试剂还含有试剂A、试剂B、试剂C、试剂D、试剂E和超纯水，以体积比计，引物混合液2～8份、试剂A 0.5～10份、试剂B 0.5～5份、试剂C 0.5～5份、试剂D 5～10份、试剂E 0.5～5份、试剂F 0.5～5份、试剂G 0.5～5份、超纯水10～30份。

4.如权利要求3所述的检测白对虾病原物的试剂，其特征在于，所述试剂A为10×BstBuffer；所述试剂B为100mM硫酸镁；所述试剂C为羟基萘酚蓝；所述试剂D为10mM dNTP预混液；所述试剂E为DNA聚合酶；所述试剂F为反转录酶、所述试剂G为抑制剂。

5.一种检测白对虾病原物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括阳性对照、阴性对照和权利要求1～4任一所述试剂。

6.如权利要求5所述的检测白对虾病原物的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为搭载有传染性皮下及造血组织坏死病毒基因的质粒、搭载有桃粒病毒基因的质粒、搭载有偷死野田村病毒基因的质粒、搭载有对虾传染性肌肉坏死病毒基因的质粒的质粒混合物。