[发明专利]鉴定万寿菊单复瓣的共分离基因分子标记、检测引物及检测试剂盒和应用在审
| 申请号： | 202310372558.1 | 申请日： | 2023-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN116356071A | 公开（公告）日： | 2023-06-30 |
| 发明（设计）人： | 何燕红;刘翠翠;朱钰;张春玲;韦陆丹 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人： | 余光军;霍雪梅 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴定 万寿菊 单复瓣 分离 基因 分子 标记 检测 引物 试剂盒 应用 | ||
1.鉴定万寿菊单复瓣的共分离基因分子标记TeCYC2e1，其特征在于，所述分子标记TeCYC2e1在单瓣万寿菊中只有一个拷贝，其核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示；所述分子标记TeCYC2e1在复瓣万寿菊中有两个拷贝，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。
2.以权利要求1所述的共分离分子标记TeCYC2e1为检测靶标基因得到的检测引物。
3.根据权利要求2所述的检测引物，其特征在于，所述检测引物由核苷酸序列为SEQ IDNO.3所示的上游引物和核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示的下游引物组成。
4.一种鉴定万寿菊单瓣或复瓣的PCR检测试剂盒，包括：PCR Master Mix、去离子水和检测引物；其特征在于，所述的检测引物是权利要求2或3所述的检测引物。
5.权利要求1所述的分子标记TeCYC2e1在万寿菊单瓣或复瓣的选育或检测中的应用。
6.权利要求2或3所述的检测引物在万寿菊单瓣或复瓣的选育或检测中的应用。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，包括：(1)提取待检测万寿菊样本的DNA为扩增模板，利用所述的共分离基因分子标记TeCYC2e1为靶标检测基因设计上、下游引物建立PCR扩增体系对待检测的样品进行PCR扩增并利用琼脂糖凝胶对扩增产物进行检测；(2)若PCR未扩增出产物，则待检测的万寿菊样本为单瓣万寿菊；若PCR扩增出一条521bp的电泳条带，则待检测的万寿菊样本为复瓣万寿菊。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述上游引物的核苷酸序列是SEQ IDNO.3所示，所述的下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示。
9.按照权利要求7所述的应用，其特征在于，所建立的PCR扩增体系为：PCRMaster Mix 12.5μl、DNA模板1μl、上游引物1μl、下游引物1μl和去离子水9.5μl。
10.按照权利要求7所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序为：94℃4min；94℃30sec，58℃30sec，72℃1min，共35个循环；72℃10min；4℃保温5min。
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