[发明专利]一种改善宠物软便的干酪乳杆菌King99及菌剂、制备方法和应用

说明书

本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种改善宠物软便的干酪乳杆菌King99及菌剂、制备方法和应用，干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)King99于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25559，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。干酪乳杆菌King99对蛋白质具有较强的水解作用，可以水解粪便中大部分难以消化吸收的蛋白质，经试验验证，在维持正常日常饮食的情况下，宠物在服用使用该菌株制备的菌剂后，可以明显改善软便症状，服用一段时间可以大大降低宠物软便率。

技术领域

本发明涉及微生物应用技术领域，具体涉及一种改善宠物软便的干酪乳杆菌King99及菌剂、制备方法和应用。

背景技术

随着宠物日粮中的肉种类变多、蛋白质来源复杂或蛋白质含量过高，宠物肠胃系统的消化系统负担增加，对蛋白质的消化率降低，从而导致宠物出现软便。为了解决软便问题，一般为使用西药或处方粮，但西药给会给宠物带来副作用，造成动物不良反应甚至危害生命；处方粮解决问题单一，长期喂食容易导致营养不良，以及因配方的偏重引起其它症状。同时，西药或处方粮只能暂时起到治疗作用，不能达到长期调节、保健的作用，停用后软便问题又会复发。

益生菌在肠道内生长繁殖，能产生多种营养物质，如维生素、氨基酸、未知生长因子等，能够促进机体对蛋白质、铁、钙的消化吸收。同时益生菌在体内还可以产生各种消化酶，比如有很强的蛋白酶，可提高转化率。蛋白酶益生菌能分解蛋白质和多肽，使蛋白质降解成小分子的蛋白胨及氨基酸等物质，一方面使养分更易利用，不容易发生软便的情况，另一方面，益生菌自身蛋白质分解后也可提供更多的营养素，可见蛋白酶益生菌在改善宠物软便症状方面具有良好的应用前景。

发明内容

针对现有的治疗宠物软便的方法安全性差、效果不持久的问题，本发明提供一种改善宠物软便的干酪乳杆菌King99及菌剂、制备方法和应用，提高宠物对蛋白质的消化吸收率，从根本上解决宠物软便问题。

第一方面，本发明提供一种改善宠物软便的干酪乳杆菌King99，干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)King99于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25559，保藏地址为中国北京。

第二方面，本发明提供一种干酪乳杆菌King99菌剂，包括上述干酪乳杆菌King99的菌体。

第三方面，本发明提供上述干酪乳杆菌King99菌剂的制备方法，具体包括以下步骤：

(1)取保藏的干酪乳杆菌King99在MRS平板培养基上活化，将活化后菌接种于MRS液体培养基中，培养获得菌液；

(2)将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于复原脱脂乳中，然后调整浓度为1.0×10¹⁰～2.0×10¹⁰cfu/mL，获得菌悬液，将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；

(3)将菌粉与葡萄糖混合，制成菌剂。

进一步的，步骤(1)中，接种于MRS液体培养基的接种量为1％～2％。

进一步的，步骤(1)中，MRS液体培养基的制备方法如下：

蛋白胨10g、牛肉粉5g、三水醋酸钠5g、七水磷酸氢二钾2g、吐温80 1mL、四水硫酸锰0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁0.2g、蒸馏水1000mL；将上述原料混合后，调pH为6.8，搅拌菌液后，在121℃、0.1MPa下灭菌20min，即可。

进一步的，步骤(1)中，培养获得菌液的培养条件为：37℃下培养24～48h。

进一步的，步骤(2)中，复原脱脂乳的浓度为15％。