[发明专利]TNFRSF1A抑制剂miR-3059-5p在治疗脑卒中疾病中的用途

说明书

本发明公开了TNFRSF1A抑制剂miR‑3059‑5p在治疗脑卒中疾病中的用途。本发明的实施例证明miR‑3059‑5p可通过负性调控TNFRSF1A表达水平抑制OGD/R诱导的神经细胞凋亡和Parthanatos死亡，进而减轻OGD/R造成的神经元损伤。故本发明的研究成果为临床上治疗脑卒中提供了一种潜在的新型药物。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及TNFRSF1A抑制剂miR-3059-5p在治疗脑卒中疾病中的用途。

背景技术

缺血性脑卒中(Ischemic stroke,IS)是一类严重威胁人类生命健康安全的急性脑血管疾病，伴随着高死亡率和致残风险[53]。IS的病理机制目前尚未完全阐明，现有的证据提示，存在多种机制共同参与IS的发生和进展，且不同机制之间还存在着相互作用。因此，进一步探索IS的病理机制有助于寻找新的治疗靶点。

细胞凋亡被认为是IS诱导神经细胞死亡的主要形式之一，在IS的进展过程中缺血区域往往伴随着大量神经细胞凋亡。这是一种细胞受到外界环境刺激后，在基因精确调控下发生的主动程序性死亡过程，主要由线粒体途径、内质网应激途径和死亡受体途径三条信号通路介导，最终激活Caspase-3等凋亡执行蛋白，造成细胞死亡。随着对细胞死亡机制的不断探索，研究者们在缺氧损伤的神经元中发现了一种全新的程序性细胞死亡形式：PARP-1依赖性细胞死亡，又被称作Parthanatos。不同于坏死或凋亡，这是一种受到调控的、非Caspase依赖性细胞死亡形式，发展过程主要包括PARP-1的过度激活、AIF由线粒体向细胞核转位以及巨噬细胞迁移抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)依赖的DNA降解。凋亡和Parthanatos已被证实在IS诱导神经细胞死亡的病理机制中发挥至关重要的作用。因此，本研究试图寻找IS中与凋亡和Parthanatos通路密切相关的基因，作为IS治疗的关靶键点。

发明内容

本发明提供了TNFRSF1A抑制剂在制备预防或治疗脑卒中的药物中的应用。

进一步，所述脑卒中是缺血性脑卒中。

术语“抑制剂”是指任何可减少TNFRSF1A蛋白的活性、降低TNFRSF1A基因或蛋白的稳定性、下调TNFRSF1A蛋白的表达、减少TNFRSF1A蛋白有效作用时间或抑制TNFRSF1A基因的转录和翻译的物质，这些物质均可用于本发明，作为对于下调TNFRSF1A有用的物质，从而可用于预防或治疗脑卒中。

所述的抑制剂包括核酸抑制剂、蛋白抑制剂、蛋白水解酶、蛋白结合分子。其中核酸抑制剂选自：以TNFRSF1A或其转录本为靶序列、且能够抑制TNFRSF1A基因表达或基因转录的干扰分子，包括：shRNA(小发夹RNA)、小干扰RNA(siRNA)、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物。蛋白结合分子选自：与TNFRSF1A蛋白特异性结合的物质，如能够抑制TNFRSF1A蛋白活性的抗体或配体。

在本发明的一些实施方案中，所述的TNFRSF1A的抑制剂是小干扰RNA(siRNA)，所述的小干扰RNA是指一种短片段双链RNA分子，能够以同源互补序列的mRNA为靶目标降解特定的mRNA，这个过程就是RNA干扰(RNA interference)过程。小干扰RNA可以制备成双链核酸的形式，它含有一个正义链和一个反义链，这两条链仅在杂交的条件下形成双链。一个双链RNA复合物可以由相互分离的正义链和反义链来制备。因此，举例来讲，互补的正义链和反义链是化学合成的，其后可通过退火杂交，产生合成的双链RNA复合物。