[发明专利]一种用于预防宠物腹泻的凝结芽孢杆菌King27及菌剂、制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于预防宠物腹泻的凝结芽孢杆菌King27，其特征在于，凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)King27于2022年8月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25556，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.一种用于预防宠物腹泻的凝结芽孢杆菌King27菌剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的凝结芽孢杆菌King27的菌体浓缩液。

3.一种如权利要求2所述凝结芽孢杆菌King27菌剂的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)取冷冻保存的凝结芽孢杆菌King27菌株进行活化，将活化后的单一菌落接种于MRS液体培养基中，40～45℃、200r/min培养18～24h，获得种子液；

(2)将种子液接种进入一级发酵培养基，通气、40～45℃、200r/min摇床培养22～26h后，得到一级发酵液；将一级发酵液移种进入二级发酵培养基，通气、40～45℃、200r/min摇床培养45～50h后，得到二级发酵液；

(3)将二级发酵液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于15％(w/w)的复原脱脂乳中，获得悬浊液；将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；

(4)将菌粉与葡萄糖混合，制成菌剂。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中活化的具体操作为：取冷冻保存的凝结芽孢杆菌King27菌株，在MRS平板培养基上进行划线培养，42℃、有氧培养48h。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，种子液接种进入一级发酵培养基的接种量为4％～6％。

6.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，一级发酵培养基和二级发酵培养基的制备方法如下：

葡萄糖40g/L、酵母膏10g/L、蛋白胨15g/L、磷酸氢二钾3g/L、硫酸锰0.05g/L、氯化铵4g/L、碳酸钙18g/L，培养基于121℃灭菌20min，冷却至40～45℃备用。

7.一种如权利要求1所述凝结芽孢杆菌King27在制备预防宠物肠道病原菌引起的腹泻的产品上的应用。

8.一种如权利要求1所述凝结芽孢杆菌King27在制备预防宠物受凉导致的季节性腹泻的产品上的应用。

9.一种如权利要求1所述凝结芽孢杆菌King27在制备预防宠物乳糖不耐受引起的腹泻的产品上的应用。