[发明专利]家蚕马氏管特异表达启动子及其应用

说明书

本发明公开了家蚕马氏管特异表达启动子及其应用，该启动子能够驱动目的基因在马氏管特异表达，为研究和利用家蚕马氏管特异基因，特别是马氏管特异高量表达的转运排泄相关基因提供了有力的工具；同时也能在家蚕马氏管特异表达外源基因，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及家蚕马氏管特异表达启动子，还涉及家蚕马氏管特异表达启动子的应用。

背景技术

家蚕是一种具有重要价值的经济昆虫，作为鳞翅目的模式生物，家蚕在理论研究和生产应用方面都具有重要作用。马氏管是家蚕重要的渗透调节器官，同时还具有重要的代谢排泄、免疫和解毒功能。此外，越来越多的证据还表明马氏管是研究人类肾脏疾病非常有前途的模型，一些肾脏疾病在昆虫和人类身上表现出相似的表型。因此，马氏管作为昆虫中具有意想不到的广泛功能的关键组织而享有极大的声誉。然而，目前对家蚕马氏管的研究比较少，主要原因是可以利用的研究手段有限。随着家蚕基因组框架图、精细图及遗传变异图谱的相继完成，家蚕转基因技术也逐步完善，有关家蚕马氏管的研究逐渐增多，但仍需要更多的其他研究工具的配合来提高家蚕马氏管的代谢排泄和解毒能力，甚至是对人类肾脏疾病发病机制提供相关见解，这也成为了后基因组时代研究人员追求的目标，事关蚕业发展。要想研究和利用家蚕马氏管有关基因进行前述研究就需要有一个家蚕马氏管特异的启动子，但目前没有家蚕马氏管特异表达启动子的相关报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种家蚕马氏管特异表达启动子；本发明的目的之二在于提供含有所述家蚕马氏管特异表达启动子的表达载体；本发明的目的之三在于提供含有所述家蚕马氏管特异表达启动子的表达盒；本发明的目的之四在于提供含有所述家蚕马氏管特异表达启动子的转化载体；本发明的目的之五在于提供含有启动子、或所述表达载体、或所述表达盒、或所述转化载体的宿主细胞；本发明的目的之六在于提供所述家蚕马氏管特异表达启动子在驱动目标基因在家蚕马氏管特异表达中的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、家蚕马氏管特异表达启动子，所述家蚕马氏管特异表达启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2、含有所述家蚕马氏管特异表达启动子的表达载体。

3、含有所述家蚕马氏管特异表达启动子的表达盒。

4、含有所述家蚕马氏管特异表达启动子的转化载体。

5、含有所述启动子、或所述表达载体、或所述表达盒、或所述转化载体的宿主细胞。

本发明优选的，所述宿主细胞为真核细胞或原核细胞。

6、所述家蚕马氏管特异表达启动子在驱动目标基因在家蚕马氏管特异表达中的应用。

本发明的有益效果在于：本发明公开了马氏管特异表达的启动子，该启动子能够驱动目的基因在马氏管特异表达，为研究和利用家蚕马氏管特异基因，特别是马氏管特异高量表达的转运排泄相关基因提供了有力的工具；同时也能在家蚕马氏管特异表达外源基因，具有良好的应用前景。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：

图1为Bm0004175基因的组织表达特征，其中A为荧光定量结果图，B为半定量结果图(He:头；Ep:表皮；Mg:中肠；Fb:脂肪体；Mt:马氏管；Sg:丝腺；Te:精巢；Ov:卵巢；Hem:血淋巴；Tr:气管)；

图2为转基因家蚕卵和成虫的显微镜下照片，其中A和C为明场下卵和成虫的照片，B和D为Red激发光下的照片。

图3为转基因家蚕和阴性对照家蚕中EGFP基因的蛋白印迹检测结果图(1：阴性对照家蚕马氏管组织；2：阴性对照家蚕除马氏管外剩余所有组织；3：转基因家蚕马氏管组织；4：转基因家蚕除马氏管外剩余所有组织)。