[发明专利]一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法及应用

权利要求书

1.一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)在绝缘的容器内设置液体管，液体管由0.45μm的滤膜构成，且底部封闭；液体管外侧依次包裹0.1μm膜和超滤膜，在0.45μm膜和0.1μm膜、0.1μm膜和超滤膜以及超滤膜和容器之间加入Native-Page凝胶；

(2)脐静脉间充质干细胞培养后，分离出上清液，加入液体管中；液体管的液体上下两端分别连接正、负电极，通入电流，电压120V，电流20mA，时间4-8h，外泌体即可通过超滤膜，留在超滤膜和容器之间，实现与其他物质的分离。。

2.如权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，电极设置时，正极位于液体管内液体的上方，负极在液体管内液体的下方；所述的电极为bio-rad电泳电极。

3.如权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞来源的外泌体的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，电极两端分别连接铂金丝，铂金丝没入液体管的液体中。

4.一种脐带间充质干细胞来源的外泌体，其特征在于，采用权利要求1-3任一项所述的制备方法制备而成。

5.如权利要求1-3任一项所述的制备方法制备的外泌体、或如权利要求4所述的外泌体在制备对血管内皮细胞损伤具有保护作用的制剂上的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的血管内皮细胞损伤为血管内皮细胞迁移能力损伤、和/或血管内皮细胞存活率降低、和/或血管内皮细胞中炎症和能量稳态调控因子。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的血管内皮细胞炎症和能量稳态调控因子失调包括：核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平提升、和/或磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)水平降低、和/或Gasdermin-D(GSDMD)水平提升。

8.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的血管内皮细胞损伤为氧糖剥夺模型所致的血管内皮细胞损伤。

9.如权利要求1-3任一项所述的制备方法制备的外泌体、或如权利要求4所述的外泌体在制备对脑缺血损伤具有保护作用的制剂上的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于：所述的脑缺血损伤为大脑中动脉栓塞(MCAO)导致的脑梗死。