[发明专利]一种抗体试剂、包括抗体试剂的试剂盒及其应用在审
申请号: | 202310398488.7 | 申请日: | 2023-04-13 |
公开(公告)号: | CN116430053A | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
发明(设计)人: | 公杰;童云丽;金立强;张俊宾;谭卿 | 申请(专利权)人: | 广州睿贝医学科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N15/14 |
代理公司: | 广州智斧知识产权代理事务所(普通合伙) 44649 | 代理人: | 罗晶 |
地址: | 510000 广东省广州市番禺区钟*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗体 试剂 包括 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种抗体试剂,其特征在于包括外标抗体和内标抗体;所述外标抗体包括:CD45、CD3e、CD4、CD8、CD25、CD69、CD19、CD49b、CD11b、CD11c、F4/80、LY6C、LY6G、MHC-II、TCR-γδ和FVS620中的至少一种;所述内标抗体包括Foxp3。
2.如权利要求1所述的抗体试剂,其特征在于,所述外标抗体包括按重量份计的抗体:CD45 0.1-0.5份;CD3e 0.1-0.5份;CD4 0.1-0.5份;CD8 0.1-0.5份;CD25 2-5份;CD69 2-5份;CD19 0.1-0.5份;CD49b 0.1-0.5份;CD11b 0.1-0.5份;CD11c 0.1-0.5份;F4/80 2-5份;LY6C 0.1-0.5份;LY 6G 0.1-0.5份;MHC-II 2-5份;TCR-γδ2-5份和FVS620 0.05-0.5份;所述内标抗体包括Foxp3 2-5份。
3.如权利要求1所述的抗体试剂,其特征在于,所述CD45、CD3e、CD4、CD8、CD25、CD69、CD19、CD49b、CD11b、CD11c、F4/80、LY6C、LY6G、MHC-II、TCR-γδ和Foxp3对应偶联的荧光标记分别为:APC-cy7、BV570、BV750、PerCP-eFluor710、PE、BV421、eFluor450、BV711、PE-Cy5.5、BB515、BV605、PE/Dazzle594、BV650、Alexa Fluor647、BV480和APC。
4.一种试剂盒,其特征在于,包括检测部和分析部;所述检测部中设有如权利要求1所述的抗体试剂。
5.如权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述分析部包括数据分析模板,所述数据分析模板的逻辑为:
细胞门内去除黏连细胞;设置CD45+FVS620-细胞门;从CD45+FVS620-门内,设置CD45和SSC细胞门,分别圈选出淋巴细胞和髓系细胞的细胞门;从淋巴细胞门内,设置CD3e和CD49b细胞门,分别检测CD3e+CD49b-T细胞,CD49b+CD3e-NK细胞,以及CD3e+CD49b+NKT细胞表达情况;从CD3e-CD49b-细胞门内,设置CD19+细胞门,检测B细胞表达情况;从淋巴细胞门内,设置CD3e和TCRγδ细胞门,其中CD3e+TCRγδ+检测TCRγδ细胞表达情况,CD3e+TCRγδ-检测淋巴细胞表达情况;从CD3e+TCRγδ-细胞门内,设置CD4和CD8细胞门,其中CD4+CD8-检测Th细胞表达情况,CD4-CD8+检测Tc细胞表达情况;从Th细胞内,设置CD25和Foxp3细胞门,CD25+Foxp3+检测Treg细胞表达情况;从Th细胞内,设置CD25和CD69细胞门,CD25+CD69-检测晚期活化Th细胞表达情况,CD25-CD69+检测早期活化Th细胞表达情况,CD25+CD69+检测过渡期活化Th细胞表达情况;从Tc细胞内,设置CD25和CD69细胞门,CD25+CD69-检测晚期活化Th细胞表达情况,CD25-CD69+检测早期活化Th细胞表达情况,CD25+CD69+过渡期活化Th细胞表达情况;从髓系细胞门内,设置CD11b和F4/80细胞门,CD11b+F4/80+检测巨噬细胞表达情况;从髓系细胞门内,设置CD11c和MHC-II细胞门,CD11c+MHC-II+检测DC细胞表达情况;从髓系细胞门内,设置LY6C和LY6G细胞门,LY6C high和LY6G-检测LY6C high单核细胞表达情况,LY6C dim和LY6G-检测LY6Cdim单核细胞表达情况,LY6C-和LY6G+检测粒细胞表达情况。
6.一种如权利要求4所述的试剂盒的应用,其特征在于,所述试剂盒用于检测细胞的表达。
7.如权利要求6所述的试剂盒的应用,其特征在于,所述细胞包括白细胞、淋巴细胞、Th细胞、Tc细胞、Treg细胞、粒细胞、单核细胞、B细胞、NK细胞、巨噬细胞、DC细胞、TCRγδT细胞、活化T细胞和髓系细胞中的至少一种。
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