[发明专利]一种菌种保存方法

权利要求书

1.一种菌种保存方法，其特征是，适用于真空冷冻干燥管中的冻干菌粉打开使用后的剩余菌粉的保存；其保存方法包括如下步骤：

(1)将剩余菌粉与灭菌的盐溶液混匀制成菌悬液；

(2)将步骤(1)的菌悬液在25～37℃下孵育0.5～1.0h；

(3)将孵育完成的菌悬液与菌种保护剂充分混匀；

(4)将步骤(3)混匀后的菌体混悬液进行冻存管分装；然后将冻存管置于-70℃～-85℃下超低温保存。

2.如权利要求1所述的菌种保存方法，其特征是，所述盐溶液组成为，按质量比计：K₂HPO₄·3H₂O 0.8％～1.0％，KH₂PO₄ 0.1％～0.3％，Na₂HPO₄·12H₂O 1.0％～1.2％，MgSO₄·7H₂O 0.02％～0.03％，其余为水。

3.如权利要求1所述的菌种保存方法，其特征是，所述的菌种保护剂为质量分数为30％～50％的灭菌甘油与过滤除菌的质量分数为0.3％～0.6％的维生素C水溶液；二者的体积比为5～50：1。

4.如权利要求1所述的菌种保存方法，其特征是，所述无菌盐溶液和菌种保护剂的体积比为1：0.8～1.2。

5.如权利要求4所述的菌种保存方法，其特征是，所述无菌盐溶液和菌种保护剂的体积比为1：1。

6.如权利要求1所述的菌种保存方法，其特征是，所述步骤(1)中菌悬液的浓度为0.5*10⁷～5*10⁷CFU/mL。

7.如权利要求1所述的菌种保存方法，其特征是，所述步骤(2)中菌悬液的孵育为摇床孵育，摇床转速为50～100rpm。

8.如权利要求1-7中任一项所述的菌种保存方法，其特征是，所述步骤(3)中冻存管体积为1～5mL。