[发明专利]一种细胞培养板及其在研究细胞之间形成的隧道纳米管中的应用

权利要求书

1.一种细胞培养板，包括基板，基板上设有样品腔室，其特征在于，每两个样品腔室对称设置，各样品腔室外侧顶端设置进样孔，在相互靠近的一侧呈侧锥形逐渐变窄的结构，末端通过连接腔道连接在一起；

所述连接腔道包括多孔竖直腔体，其将连接腔道分为上部空间和下部空间，所述上部空间为多孔竖直腔体内部的空间，所述下部空间为多孔竖直腔体的底部与基板底板之间的区域，下部空间的高度为1～2μm。

2.根据权利要求1所述的一种细胞培养板，其特征在于，所述多孔竖直腔体的顶端封闭，其顶板、前后侧壁与所述细胞培养板一体连接，其材质与样品腔室的相同；所述多孔竖直腔体的左右侧壁和底板为多孔的过滤膜结构。

3.根据权利要求2所述的一种细胞培养板，其特征在于，所述过滤膜为聚碳酸酯膜、聚酯纤维薄膜、聚对苯二甲酸乙二醇酯膜、聚四氟乙烯膜中的任一种，孔径设置为0.4～3μm。

4.根据权利要求1所述的一种细胞培养板，其特征在于，所述多孔竖直腔体的宽度与连接腔道的宽度相同，多孔竖直腔体的长度范围5～100μm。

5.根据权利要求1所述的一种细胞培养板，其特征在于，所述样品腔室的进样孔端呈方形结构，其内部高度为0.1mm。

6.根据权利要求1所述的一种细胞培养板，其特征在于，所述样品腔室的内侧端，即从侧锥形的初始部位至连接腔道，其内部的高度为0.2mm，此部位的样品腔室底板与基板底板重合。

7.根据权利要求1所述的一种细胞培养板，其特征在于，所述基板上设置的样品腔室的数量为大于等于2的偶数。

8.一种细胞培养板在研究细胞之间形成的隧道纳米管中的应用，采用权利要求1～7任一项所述的一种细胞培养板，其特征在于，应用方法包括：

将两个不同种类细胞的细胞悬液分别加入到两个对称的样品腔室中，放入无菌CO₂培养箱中培养，细胞贴壁后，将所述细胞培养板取出，放到光学显微镜下观察连接腔道的下部空间区域；

或者，首先使用荧光染色法分别将两个不同种类细胞的F-actin进行标记，然后，将标记了不同染料的两类细胞的细胞悬液分别加入到两个对称的样品腔室中，放入无菌CO₂培养箱中培养，细胞贴壁且延展后，将所述细胞培养板取出，于激光共聚焦显微镜下观察两类细胞之间F-actin的相互作用，进行隧道纳米管介导的胞间通讯在两类细胞之间的研究。