[发明专利]一种独活多糖银纳米粒及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种独活多糖银纳米粒及其制备方法和应用，属于生物学技术领域。本发明首先使用干燥后的独活来制备独活粗多糖，然后Sevag混合液脱除独活粗多糖中的蛋白，之后加入硝酸银溶液来制备出独活粗多糖银纳米粒。本发明通过实验发现，本发明所制备的独活多糖银纳米粒具有优异的抗菌和抗氧化的功能，并且与四环素联合使用时能够产生显著的协同效果。

技术领域

本发明属于生物学技术领域，尤其涉及一种独活多糖银纳米粒及其制备方法和应用。

背景技术

独活是一种传统的中药，味辛、苦，性微温，归肾、膀胱经，具有祛风除湿，通痹止痛功效，用于风寒湿痹，腰膝疼痛，少阴伏风头痛，风寒挟湿头痛。现代药理学研究发现，独活具有一定的抗炎、镇痛作用，且可通过抑制环加氧酶起到抗风湿性关节炎的药理作用。多糖作为中药活性成分之一，具有免疫增强、抗炎、抗氧化等多种生物活性，但目前关于从中药独活中提取的独活多糖的生药理活性研究鲜有报道。

随着纳米技术的发展，银纳米粒的制备与应用得到了广泛的研究。研究报道，银纳米粒具有抗菌、促进组织细胞的生长、加速伤口的愈合、减少疤痕的生成的作用。但是，银纳米粒在人和动物上使用安全窗口窄，有研究发现银纳米粒可能对小鼠产生神经毒性，而且其合成过程中多使用有毒化学试剂如硼氢化钠等，这造成了试剂的浪费，甚至引发环境污染的可能，从而极大的限制了其制备和应用。本发明利用从天然中药独活中提取的独活多糖还原硝酸银，绿色制备独活多糖银纳米粒，探索其抗氧化活性，为新型抗氧化药物研究提供理论与技术支持。

随着抗生素的广泛应用，细菌耐药性不断增强，超级耐药细菌层出不穷，抗菌治疗面临着困难。药物与抗生素联合应用可以发挥药物的协同抗菌作用，减少细菌快速继发耐药的风险。本发明利用独活多糖银纳米粒与四环素联合应用，探究独活多糖银纳米粒的协同抗生素抗菌活性，为减少抗生素的使用以及降低耐药菌耐药性的研究提供前期理论依据，为新型抗菌药物的研发奠定研究基础。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时具有抗菌和抗氧化功能的独活多糖银纳米粒。

为实现上述目的，本发明提供了一种同时具有杀菌功能和抗氧化功能的独活多糖银纳米粒，每200g干燥的独活残渣来制备所述独活多糖银纳米粒的制备方法如下：

(1)将干燥的独活放置于容器中，加入95％乙醇溶液没过药材，在常温下浸泡12个小时后，冷凝回流4小时，之后将滤渣放入烘箱中干燥；

(2)取200g干燥的独活滤渣用其4倍体积的超纯水浸泡12个小时，70℃下浸提2小时，收集滤液，再重复煎煮2次，合并三次煎煮液，旋转蒸发仪浓缩至150mL，加入4倍体积的无水乙醇，边加边搅拌，静置过夜；

(3)4000rpm离心10min分离沉淀，真空冷冻干燥得独活粗多糖；

(4)将冻干后的独活粗多糖用300mL超纯水复溶，配制成1.5％的独活粗多糖溶液，加入100mL Sevag混合液，磁力搅拌后静置两小时分层，保留上层，重复8次；

(5)使用旋转蒸发仪浓缩后，真空冷冻干燥机干燥得到除蛋白的独活多糖；

(6)配制1.0mg/mL的独活多糖溶液，经0.2μm微孔滤膜过滤2mL于10mL西林瓶中，磁力搅拌下，缓慢滴入1mM硝酸银溶液2mL，避光搅拌反应6小时，得到独活多糖银纳米粒。

优选地，所述杀菌功能为抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。

优选地，所述抗氧化功能为抑制DPPH、ABTS⁺·、羟基自由基。

其次，本发明提供了独活多糖银纳米粒在制备同时具有抗菌功能和抗氧化功能的药物中的应用。

优选地，所述独活多糖银纳米粒由权利要求1所述的独活多糖银纳米粒的制备方法制备得到。