[发明专利]一种米卡芬净中间体FR901379高产菌株及其应用

说明书

本发明提供一种菌株HQ‑MK‑011，拉丁学名为Colephoma empetri，保藏编号为CGMCC No.40516，于2023年03月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明菌株HQ‑MK‑011为诱变得到的高产菌株，发酵单位较高，且能稳定生产FR901379。通过本发明菌株HQ‑MK‑011得到的发酵液粘度明显减少，有利于溶氧的传递，使得发酵罐得到相同产量的周期明显缩短，相同周期的发酵单位明显提高，最高可达约4g/L。通过本发明菌株的得到的发酵液的杂质比例下降，使下游提取工艺成本减少，有利于工业化生产。

技术领域

本发明属于微生物发酵领域，具体涉及一种产米卡芬净中间体FR901379的高产菌株及其制备方法和应用。

背景技术

FR901379是合成米卡芬净类药的重要前体物质，通过脱酰化作用后得到米卡芬净母核FR179642，米卡母核化学合成得到的新型棘白菌素类抗真菌药物米卡芬净；它对念珠菌如白念珠菌、光滑念珠菌、热代念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌有较好的抑制活性，对于曲霉也有良好的体外抑制活性，但对于新生隐球菌、镰刀菌、接合菌和白吉利毛孢子菌等无抑制活性。

米卡芬净(Micafungin)商品名为Fungusrd，可以用于治疗食道念珠菌感染、骨髓移植及ADS患者中性粒细胞减少症的预防治疗。

FR901379可以通过发酵菌株进行生产。

中国专利CN202210496769.1中公开了一株高产FR901379的菌株，所述菌株为岩高兰鞘茎点霉(Coleophoma empetri)H40-23，所述菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC No.40075，保藏日期为2022年1月29日，该发明还提供了上述菌株在生产FR901379中的应用。该菌株FR901379产量为587.8mg/L，比对照菌株(365.2mg/L)高222mg/L，比诱变前提高了60.8％。但其产量对于实际生产仍有较大的提升空间。

中国专利CN201810536315.6中公开了一种FR179642的制备方法，该方法包括：1)发酵FR901379的培养基的制备；2)将菌株Coleophoma empetri种子培养液接种于发酵培养基进行发酵；3)在发酵培养24-72h后，向发酵液中补加棕榈酸甲酯和二甲基硅油混合物；4)当发酵160h后，FR901379的浓度不再增长时，发酵结束；5)将上一步得到的FR901379与脱酰酶交联酶聚体反应，转化为FR179642。其方法中FR901379放罐浓度为3.40g/L。虽然FR901379产量有所提升，但其适用的培养基粘度会偏高，不利于溶氧传递。此外，该专利中的菌株发酵通过补加棕榈酸甲酯和二甲基硅油来提高FR901379的产素水平，使发酵成本增加且工艺更加复杂化。因此，获得更优良的种质资源对于FR901379的生产十分必要。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了提供了一种菌株HQ-MK-011，通过对其进行发酵，可以大量生产FR901379，能够为米卡芬净类药的生产提供大量原料，解决临床需求问题。

一方面，本发明提供了一种菌株HQ-MK-011。

所述的菌株HQ-MK-011的拉丁学名为Coleophoma empetri，保藏编号为CGMCCNo.40516，于2023年03月06日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

所述的菌株HQ-MK-011的菌落颜色为灰黑色，表面有凹痕。

另一方面，本发明提供了前述的菌株HQ-MK-011在制备FR901379中的应用。

再一方面，本发明提供了一种生产FR901379的方法。

所述的方法中包括将权利要求1所述的菌株HQ-MK-011接种于培养基后进行发酵。