[发明专利]一种用于化学发光检测的微球组合物及其应用在审
申请号: | 202310485992.0 | 申请日: | 2019-07-18 |
公开(公告)号: | CN116577319A | 公开(公告)日: | 2023-08-11 |
发明(设计)人: | 杨阳;刘宇卉;李临 | 申请(专利权)人: | 上海索昕生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N21/76 | 分类号: | G01N21/76;G01N21/01 |
代理公司: | 北京睿阳联合知识产权代理有限公司 11758 | 代理人: | 康志梅 |
地址: | 上海市浦东新区自由贸易试*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 化学 发光 检测 组合 及其 应用 | ||
1.一种用于化学发光检测的微球组合物,其包括:
供体微球,其能够在激发状态产生活性氧,所述供体微球表面包被有标记物;和,
受体微球,其能够与活性氧反应生成可检测的化学发光信号,所述受体微球表面包被有生物分子,所述生物分子能够与待测目标分子特异性结合;
其中,所述供体微球的粒径等于所述受体微球的粒径。
2.根据权利要求1所述的微球组合物,其特征在于,所述供体微球与受体微球的平均粒径均为20nm-350nm,优选为50nm-300nm,更优选为100nm-250nm,最优选为180nm-220nm。
3.根据权利要求1或2所述的微球组合物,其特征在于,所述供体微球包括第一载体,所述第一载体的内部填充有敏化剂,所述第一载体的表面化学键合标记物;
优选地,所述第一载体的表面没有包被或连接有多糖物质,其直接化学键合标记物。
4.根据权利要求3所述的微球组合物,其特征在于,所述标记物为亲和素;
优选地,所述亲和素选自卵白亲和素、链霉亲和素、卵黄亲和素、中性亲和素和类亲和素,进一步优选选自中性亲和素或链霉亲和素;和/或,
所述亲和素通过氨基与所述第一载体表面的醛基反应形成席夫碱的方式化学键合在所述第一载体的表面。
5.根据权利要求3或4所述的微球组合物,其特征在于,所述第一载体的表面带有键合官能团,所述键合官能团用于将标记物化学键合在所述第一载体的表面;
优选地,所述键合官能团选自胺基、酰胺基、羟基、醛基、羧基、马来酰亚胺基和巯基;优选选自醛基和/或羧基。
6.根据权利要求5所述的微球组合物,其特征在于,所述第一载体表面的键合官能团的含量为100~500nmol/mg,优选为200~400nmol/mg。
7.根据权利要求3所述的微球组合物,其特征在于,所述第一载体的表面包被有亲水性的醛基葡聚糖,所述醛基葡聚糖的醛基化学键合标记物。
8.根据权利要求1-7中任意一项所述的微球组合物,其特征在于,所述受体微球包括第二载体,所述第二载体的内部填充有发光组合物,所述第二载体的表面包被有至少一层多糖层,所述多糖层的表面连接有生物分子;优选地,所述第二载体的表面包被有亲水性的羧基葡聚糖。
9.根据权利要求8所述的微球组合物,其特征在于,所述发光组合物包括铕配合物;进一步优选地,所述铕配合物为MTTA-EU3+。
10.一种用于化学发光检测的试剂组合物,其包括供体试剂和受体试剂,所述受体试剂中包含如权利要求1-9中任意一项所述的微球组合物中的受体微球;其中所述受体微球在所述受体试剂中的粒径分布变异系数C.V值≥5%;所述供体试剂中包含如权利要求1-9中任意一项所述的微球组合物中的供体微球;其中所述供体微球在所述供体试剂中的粒径分布变异系数C.V值≥5%。
11.一种化学发光检测方法,其包括将待测样本与如权利要求1-9中任意一项所述的微球组合物或权利要求10所述的试剂组合物接触的步骤。
12.一种化学发光检测系统,其利用如权利要求1-9中任意一项所述的微球组合物或权利要求10所述的试剂组合物和/或权利要求11所述的方法检测待测样本中的待测目标分子。
13.根据权利要求12所述的系统,其特征在于,所述装置包括如下部分:
反应装置,其用于待测样本与供体微球、受体微球发生化学反应;
激发和读数装置,其使用600-700nm波长的激发光激发供体微球产生活性氧,受体微球与接收到的活性氧反应生成520-620nm的发射光,记录上述发射光的光信号;
处理器,其根据所记录的所述发射光的光信号的存在和/或强度判断测待测样本中是否存在待测目标分子和/或确定待测目标分子的含量。
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