[发明专利]一种成人化实验小鼠模型的建立方法

说明书

本发明公开了一种成人化实验小鼠模型的建立方法，特别涉及于实验小鼠模型技术领域，本发明通过将农场购买的野生雌性宠物小鼠与6～8周SPF级雌性Balb/c小鼠合笼共饲养，通过一个合适的比例2:6和一个合适的合笼时间4周，既可以引起Balb/c小鼠的免疫系统发生变化，又不至于引起过多小鼠死亡，通过流式细胞术检测合笼后Balb/c小鼠效应记忆T细胞的比例，合笼4周后，将Balb/c小鼠与野生宠物鼠分开饲养，接下来的7周观察发现合笼成功的小鼠健康状况更好，合笼后的Balb/c小鼠免疫系统发生变化，更接近成人的免疫系统，利用该种合笼方法获得成人化实验小鼠简单，方便，利用合笼成功的Balb/c小鼠进行实验研究，更有利于将实验结果转化到临床。

技术领域

本发明属于实验小鼠模型技术领域，具体是一种成人化实验小鼠模型的建立方法。

背景技术

人类疾病的发展十分复杂，以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制，不仅在时间和空间上都存在局限性，而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究，通过观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究，有助于更方便、更有效地认识人类疾病的发生发展规律，研究防治措施。

SPF级小鼠一直生长于无菌环境，免疫细胞组成接近新生儿，与临床长期暴露在环境微生物中的病人不同，越来越多的人担心实验室老鼠和人类免疫系统不同，以此动物模型的研究成果不易转化到临床。

文献报道通过SPF级C57小鼠接触野生或宠物商店小鼠后引入的共生和致病微生物，可显著影响免疫系统的细胞组成和功能。SPF级小鼠缺乏有效分化和粘膜分布的记忆T细胞，这更像新生儿而不是成年人。通过引入致病微生物，使小鼠CD8+T细胞分化发生改变，效应记忆T细胞(CD44hi,CD62Llo)比例升高，免疫系统更接近成人。

文献报道通过将SPF级C57小鼠与宠物鼠共饲养，可以引起C57小鼠免疫细胞组成发生变化，效应记忆T细胞比例升高，抗感染能力升高，但未见Balb/c小鼠在其方面的相关报道，建立一个合适的合笼方法用在Balb/c小鼠上很重要，因为这样可以进行老鼠与老鼠之间的实验，例如骨髓移植。

发明内容

本发明的目的在于提供一种成人化实验小鼠模型的建立方法。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：一种成人化实验小鼠模型的建立方法，包括如下步骤：

(1)野生雌性宠物鼠与6～8周SPF级雌性Balb/c小鼠共饲养，共饲养时间为4周，4周之后分开单独饲养，饲养在处于普通室内环境的笼子里；

(2)合笼共饲养四周后，尾静脉取血20μl，标记抗体30min：CD3-FITC,CD4-BV421，CD8-Percp-cy5.5，CD44-APC，CD62L-PE，流式细胞术检测合笼后Balb/c小鼠效应记忆T细胞的比例，确定合笼是否成功。

优选地，上述步骤(1)中野生雌性宠物鼠与SPF级雌性Balb/c小鼠的饲养比例为2:6。

优选地，上述步骤(1)中笼子长宽高分别为28cm、17cm和16cm，垫料为玉米芯，饲料为高压鼠粮。

优选地，上述步骤(2)中确定合笼是否成功的条件为：效应记忆T细胞比例小于8％视为合笼不成功，大于8％视为合笼成功。