[发明专利]一种紫花苜蓿杂交方法

权利要求书

1.一种紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1，父母本确定：选择授粉率高或种质的单株，且父母本配合力高，父本花粉活力强，萌发正常的品种；

S2，花序的选择：母本选择花序处于旗瓣且翼瓣也开始展开的花序，父本选择花粉活力强的花序；

S3，授粉：用含ddH₂O的棉签粘取父本的花粉，触碰母本柱头进行授粉；

S4，套袋与标记：采用茶叶过滤袋套袋并标记；

S5，杂交后进行养护管理；

S6，杂交子代的鉴定：根据父母本SGR基因的序列差异，通过扩增子代SGR基因序列判断是否为杂交种，判断标准为：测序结果显示仅有母本的基因序列判断为母本，既有父本基因序列也有母本基因序列则为杂交种。

2.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S3中，授粉过程为：挤压父本龙骨瓣打开小花，漏出花粉，用含ddH₂O的棉签粘取父本的花粉，挤压母本的花序，打开小花，用含有父本的棉签触碰母本柱头进行授粉，重复3-5次。

3.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S1中，母本为无棣苜蓿，父本为种质NM-1。

4.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S2中，所述的花序的选择：健壮花枝中上部的花序，且花序中少或无小花开放，去除掉已开放小花，且花序中的小花多处于旗瓣完全伸出花萼且长于花萼2-3mm，翼瓣也开始展开的状态。

5.根据权利要求3的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，母本选择3-5期的花序，父本选择5-6期的花序。

6.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S2中，花粉活力通过TTC法测定。

7.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S1-S2中，所述的花粉活力强指的是TTC法花粉染色率60％。

8.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S4中，所述的茶叶过滤袋套袋规格为4*6cm。

9.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S5中，具体养护管理过程为：授粉后及时观察，查看套袋脱落、标记脱落或字迹模糊情况，通过后期植株的绑苗等措施增加通风，防治及下雨后湿度太大引起种子霉变，及时采收种子避免脱落。

10.根据权利要求1的紫花苜蓿杂交方法，其特征在于，S6中，所述母本的基因序列包括无棣-SGR-序列1和无棣-SGR-序列2，所述父本基因序列为NM2-SGR-序列；

所述无棣-SGR-序列1的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述无棣-SGR-序列2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述NM2-SGR-序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。