[发明专利]一种多种含磷物质同步定量的荧光探针、制备方法及装置

权利要求书

1.一种多种含磷物质同步定量的荧光探针，其特征在于，包括三种，分别为掺杂不同金属离子、不同颜色的硫化锌量子点：ZnS:Cu⁺-cyan-Fe³⁺、ZnS:Cu⁺-yellow-Sn²⁺、ZnS:Cu⁺-orange-Ni²⁺，三者本身紫外灯照射下无荧光，分别在与PPi、Pi、ATP反应后紫外灯照射下恢复为青色、黄色、橙红色。

2.根据权利要求1所述的荧光探针，其特征在于：所述硫化锌表面具有羧酸基团，能够为金属离子配位提供结合位点。

3.根据权利要求1或2所述的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤：

(1)称量1～10mmol的乙酸锌和0.01～0.1mmol的五水硫酸铜并溶解在50～500mL超纯水中，超声溶解后缓慢加入100～1000μL的3-巯基丙酸(MPA)，混合溶液继续进行超声溶解；使用1～2mol/L的氢氧化钠调节pH值为7～11；取10～50mL的混合溶液进行水热反应，反应温度为100～200℃，反应时间设置a、b、c三组，其中a为10～50min，b为60～150min，c为160～250min，将三组不同水热时间制备的硫化锌量子点冷却到室温后，分别用透析袋透析1～2天，a组得到ZnS:Cu⁺-cyan，b组得到ZnS:Cu⁺-yellow，c组得到ZnS:Cu⁺-orange；

(2)将步骤(1)得到的三种不同颜色的硫化锌量子点分别掺杂金属离子Fe³⁺、Sn²⁺、Ni²⁺，获得三种荧光探针：ZnS:Cu⁺-cyan-Fe³⁺，ZnS:Cu⁺-yellow-Sn²⁺，ZnS:Cu⁺-orange-Ni²⁺；其中：

ZnS:Cu⁺-cyan-Fe³⁺荧光探针的制备过程包括：0.5～1mL的ZnS:Cu⁺-cyan与0.5～1mL的超纯水在4mL比色皿内进行混合，然后加入Fe³⁺到混合液中，在荧光仪上进行荧光光谱测定，根据荧光猝灭情况来选择最优Fe³⁺浓度；

ZnS:Cu⁺-yellow-Sn²⁺荧光探针的制备过程包括：0.5～1mL的ZnS:Cu⁺-yellow与0.5～1mL的超纯水在4mL比色皿内进行混合，然后加入Sn²⁺到混合液中，在荧光仪上进行荧光光谱测定，根据荧光猝灭情况来选择最优Sn²⁺浓度；

ZnS:Cu⁺-orange-Ni²⁺荧光探针的制备过程包括：0.5～1mL的ZnS:Cu⁺-orange与0.5～1mL的超纯水在4mL比色皿内进行混合，然后加入Ni²⁺到混合液中，在荧光仪上进行荧光光谱测定，根据荧光猝灭情况来选择最优Ni²⁺浓度。

4.根据权利要求1至3任意一项所述的荧光探针，其特征在于，应用于多种含磷物质的同步定量，包括以下具体内容：用多种已知浓度的PPi、Pi、ATP溶液分别与ZnS:Cu⁺-cyan-Fe³⁺，ZnS:Cu⁺-yellow-Sn²⁺，ZnS:Cu⁺-orange-Ni²⁺三种荧光探针反应，并分别在反应充分后检测反应液在紫外灯照射下的荧光图，分析图片的RGB值，分别获得PPi、Pi、ATP浓度与RGB值的关系曲线；将待测样品加入到三种荧光探针溶液中，待反应充分后，分别检测反应液在紫外灯照射下的荧光图，分析图片的RGB值，对应三个关系曲线获得待测样品中的PPi、Pi、ATP浓度。