[发明专利]一种用于法医鉴定的同时检测DNA遗传标记和RNA分子标记的方法在审
申请号: | 202310534514.4 | 申请日: | 2023-05-12 |
公开(公告)号: | CN116426618A | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
发明(设计)人: | 王乐;缪磊;赵杰;张驰;康克莱;季安全 | 申请(专利权)人: | 公安部鉴定中心 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12Q1/6869;C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 何叶喧 |
地址: | 100038 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 法医鉴定 同时 检测 dna 遗传 标记 rna 分子 方法 | ||
1.一种获得法医生物检材的生物信息的方法,包括如下步骤:
(1)取法医生物检材,提取核酸,得到同时含有DNA和RNA的核酸提取液,命名为TNA溶液;
(2)以所述TNA溶液为模板,进行逆转录,得到逆转录溶液;
(3)将混合溶液或者所述逆转录溶液作为模板溶液,进行PCR扩增;所述混合溶液指的是所述TNA溶液和所述逆转录溶液的混合液;所述PCR扩增中,采用的引物由引物组甲和引物组乙组成;所述引物组甲由110种引物组成,核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1至SEQ IDNO:110所示;所述引物组乙由16种引物组成,核苷酸序列依次如SEQ ID NO:111至SEQ IDNO:126所示;
(4)取步骤(3)获得的PCR扩增产物,进行文库构建,获得文库溶液;
(5)将所述文库溶液进行测序,获得法医生物检材的生物信息。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述生物信息为DNA信息和RNA信息。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:
所述步骤(1)中,提取核酸采用试剂盒E或试剂盒D;
所述试剂盒E为Qiagen公司的miRNeasy Micro Kit;
所述试剂盒D为康为世纪公司的超纯RNA提取试剂盒。
4.如权利要求1至3中任一所述的方法,其特征在于:进行步骤(3)的PCR扩增时,模板溶液的加样原则为:TNA溶液中DNA和RNA的质量配比为1:n;当n≤5时,PCR扩增体系中仅加入所述逆转录溶液作为模板溶液;当n>5时,PCR扩增体系中加入逆转录溶液和TNA溶液同时作为模板溶液。
5.如权利要求1至4中任一所述的方法,其特征在于:所述法医生物检材为血液和/或唾液。
6.引物组合,由引物组甲和引物组乙组成;所述引物组甲由110种引物组成,核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:110所示;所述引物组乙由16种引物组成,核苷酸序列依次如SEQ ID NO:111至SEQ ID NO:126所示。
7.权利要求6所述引物组合的应用,为如下(a)或(b)或(c)或(d):
(a)在制备法医鉴定试剂盒中的应用;
(b)在法医鉴定中的应用;
(c)在制备用于从法医生物检材中获取生物信息的试剂盒中的应用;
(d)在从法医生物检材中获取生物信息中的应用。
8.权利要求6所述引物组合和核酸提取试剂的应用,为如下(a)或(b)或(c)或(d):
(a)在制备法医鉴定试剂盒中的应用;
(b)在法医鉴定中的应用;
(c)在制备用于从法医生物检材中获取生物信息的试剂盒中的应用;
(d)在从法医生物检材中获取生物信息中的应用;
所述核酸提取试剂为权利要求3中所述的试剂盒E或试剂盒D。
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