[发明专利]用于防治红芸豆根腐病的微生物种衣剂及制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于防治红芸豆根腐病的微生物种衣剂，其特征在于：包含活性成分和助剂；活性成分选自解淀粉芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌；所述解淀粉芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)D-23菌株，于2021年5月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCC No.22293；

所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)WZ-P2-1菌株，于2021年5月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCC No.22294。

2.根据权利要求1所述的微生物种衣剂，其特征在于，将解淀粉芽孢杆菌D-23菌株和巨大芽孢杆菌WZ-P2-1菌株混合发酵液作为活性成分，有效含菌量≥1×10⁹cfu/mL。

3.根据权利要求1所述的微生物种衣剂，其特征在于，所述的助剂以水为介质，包含成膜剂、分散剂、防腐剂、防冻剂、着色剂中的一种或几种。

4.根据权利要求3所述的微生物种衣剂，其特征在于，所述的助剂包括成膜剂、分散剂、防腐剂、防冻剂、着色剂，其中成膜剂是羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、聚乙烯醇、乙基纤维素的一种或几种；分散剂为木质素磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠的一种或几种；防腐剂为苯甲酸钠、山梨酸钾的一种；防冻剂为乙二醇、甘油、丙二醇的一种；着色剂为亮蓝、酞青蓝、结晶紫的一种。

5.根据权利要求3所述的微生物种衣剂，其特征在于，所述的微生物种衣剂各助剂的质量百分含量为：成膜剂3～5％，分散剂5～10％，防腐剂0～0.5％，防冻剂0～5％，着色剂0～0.4％。

6.一种权利要求1-5任一所述微生物种衣剂的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行配置：

(1)使用无菌接种环分别挑取D-23、WZ-P2-1在NA培养基上的单菌落，接种至NB培养液，于28℃，180r·min^-1培养12h，获得种子液；NA培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂粉15g，pH7.0左右，蒸馏水1000mL；NB培养液配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，pH7.0左右，蒸馏水1000mL；

(2)分别以1％的接种量将各菌株种子液共同接种到NB培养液中，28℃，180r·min^-1培养48h得到混合发酵液；

(3)将成膜剂在80℃水浴中搅拌溶解并冷却后，与上述发酵液以一定比例混合，之后分别加入分散剂、防腐剂，防冻剂，着色剂，混合均匀。

7.一株抑制红芸豆根腐病菌的菌株，其为解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)D-23菌株，于2021年5月8日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCCNo.22293。

8.一株具有解磷作用的菌株，其为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)WZ-P2-1菌株，于2021年5月8日保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为：CGMCC No.22294。

9.如权力要求7或8所述的菌株在制备微生物种衣剂中的应用。

10.如权利要求1-5任一所述微生物种衣剂在红芸豆种子包衣中的应用。