[发明专利]一种核桃粕蛋白活性肽及其应用

说明书

本发明公开了一种核桃粕蛋白活性肽，活性肽为五肽，其氨基酸序列为Phe‑Asp‑Trp‑Leu‑Lys，该核桃粕蛋白活性肽具有抑制血管紧张素转换酶活性，其半数抑制浓度(IC₅₀)值为8.02μg/mL，本发明核桃粕蛋白活性肽采用常规酶水解手段，水解核桃油加工副产物核桃粕蛋白制得的，原料属于食品加工的副产物；且其结构简单、活性强、安全性高，也可通过人工合成手段获得，本发明为开发具有ACE抑制功能的食品、保健品以及合成高血压治疗药物提供参考，具有广泛的应用前景和十分重要的意义。

技术领域

本发明属于食源性蛋白活性肽技术领域，具体涉及一种来源于核桃粕的活性肽及其抑制血管紧张素转化酶活性，属于低副资源高值化开发领域。

背景技术

生物活性肽是特异性的蛋白质片段，可天然存在于生物体中，或在食品加工过程中蛋白质降解产生。食源中的生物活性肽泛指两类，一类是能有效促进机体功能或状态来改善人类健康的生物活性肽，一类是能赋予食物以鲜味和醇厚味的生物活性肽。

高血压是心脑血管疾病发展的主要危险因素。血管紧张素转换酶(ACE)是高血压发病机理中关键酶。当前，我国高血压患者急剧增加，患病人群的年龄越来越小。抑制ACE是医疗干预高血压的一种重要而有效的手段。但是长期服用降血压药物都有一定的副作用。在此背景下，一些具有强ACE抑制活性的食源蛋白生物活性肽被认为是预防、控制高血压发生和发展的安全手段。所以，研发食源蛋白生物活性肽也已称为全球研究的热点。

核桃是世界四大坚果中的一员，具有极高的营养价值，一直被认为是温补肺肾、促进心脑健康、强身健体的最佳食材。核桃仁富含油脂，且油脂中不饱和脂肪酸含量高，是核桃工业化经济效益的重要物质基础。核桃油生产中产生大量的核桃粕，因核桃粕中的蛋白质可高达50％以上，少部分被开发为核桃蛋白粉，但是大部分仍是被用作动物饲料。核桃粕应被有效开发，成为核桃产业新的经济效益点。已有报道核桃粕酶解物具有ACE抑制活性，201910228464.0公开了一种具有ACE抑制活性的核桃粕多肽及其制备方法，利用蛋白提取、酶解、色谱分离和纯化等传统技术，获得两条肽，但是不能明确其对ACE抑制活性的IC50值，不能量化其ACE抑制活性的强弱。目前公开的这类传统开发技术虽然能明确到肽的序列，但是存在原料需要预处理、实验周期长、经费投入大、一些高活性片段可能被忽略等不足。

发明内容

本发明是充分利用生物信息学的方法，借助生物活性肽信息库，从生物活性肽的分子量、生物活性水平、极性、ADMET(吸收、分布、代谢、排泄和毒性)等性质角度，结合高通量质谱信息，从常规酶解技术水解核桃粕产物中筛选具有潜在ACE抑制活性的肽段，再结合分子对接确定与ACE(PDB ID：1O8A)结合稳定的肽段，逐级筛查得到既具有ACE抑制活性、又无毒还可溶于水、被人体肠道吸收的五肽FDWLR。

对筛查得到的五肽FDWLR进行化学合成，得到纯度为98％的合成肽，采用试剂盒法，测定该五肽FDWLR抑制ACE的能力，其IC₅₀值为8.02μg/mL，即10.9μM。

本发明核桃粕蛋白活性肽是具有抑制ACE能力的五肽，来源于核桃粕，其氨基酸序列为Phe-Asp-Trp-Leu-Lys(FDWLR)。

本发明所述的血管紧张素转化酶抑制剂的成分(或有效成分)为上述核桃粕蛋白活性肽，还可以加入一种或多种药物、食品可接受的辅料，以改善药物、食品吸收效果或便于使用，制成适宜的使用剂型，如制成胶囊或丸剂、粉剂、片剂、粒剂、口服液和注射液等，即制成药剂学上适宜的使用剂型，或食品领域适宜的食用方式；可应用于制备治疗或者辅助治疗高血压的功能食品、保健品和药物。

本发明优点和技术效果：