[发明专利]一种链球菌前噬菌体裂解酶lys733及其应用

说明书

本发明公开了一种链球菌前噬菌体裂解酶lys733及其应用。属于生物工程技术领域。本发明从乳房链球菌HB‑4基因组中克隆得到链球菌前噬菌体裂解酶lys733，采用原核表达方式，诱导表达出可溶的裂解酶。链球菌前噬菌体裂解酶lys733对链球菌属内可致奶牛乳腺炎的无乳链球菌和停乳链球菌具有较为特异的抑菌效果，为预防和治疗上述细菌感染的疾病奠定了基础。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，更具体的说是涉及一种链球菌前噬菌体裂解酶lys733及其应用。

背景技术

链球菌属(streptococcus)细菌属于革兰氏阳性菌，广泛分布于自然界、人及动物的粪便及健康人的鼻咽部，其中包括了种类繁多的致病菌。感染牛的停乳链球菌、无乳链球菌和乳房链球菌等细菌可导致奶牛乳腺炎等症状，给畜牧养殖业造成了巨大的损失。抗生素的出现，使链球菌感染得到了一定的控制。但随着抗生素在畜牧养殖行业的不规范使用，使其耐药性逐渐变强，由此出现的多重耐药菌已没有可用的抗生素进行治疗，因此，迫切需要研发新一类的抗菌药物或抗菌剂用于链球菌感染的防控。

噬菌体是一种能够感染细菌、古菌等原核微生物的病毒，其可通过“穿孔素-裂解酶”二元系统快速裂解细菌，因此噬菌体及其衍生的裂解酶可作为抗生素的替代抗菌剂。噬菌体的裂解谱一般较窄，且由于细菌可以快速进化出表面受体的抗性，使得其应用受限。而由噬菌体衍生的裂解酶具有相对广泛的裂解谱，可作为一种高效安全的天然抗菌剂，用于耐药病原细菌的防控。噬菌体裂解酶用作抗菌剂具有以下优势：(1)可以特异性地快速杀灭宿主细菌；(2)裂解酶作用于细菌表面的肽聚糖，由于肽聚糖是细胞壁的关键成分，其种内保守性很高，因此裂解酶表现出更为广谱的裂解活性，也决定了细菌对裂解酶更难产生抗性；(3)将裂解酶用于治疗病原细菌感染的动物时，宿主动物会针对其产生抗体，但裂解酶的活性中心一般不是暴露于表面的抗原表位，因此针对裂解酶的抗体不会削弱其裂解杀菌作用；(4)裂解酶与其它抗菌剂如抗生素联用具有协同抗菌效应，不仅能够拓宽裂解谱，且能够更有效地发挥抗菌活性，降低细菌产生抗性的概率。

针对奶牛乳腺炎相关的多种链球菌感染引起的疾病，目前尚未研发出广谱有效的链球菌噬菌体裂解酶，并将其应用于链球菌感染的防控。由于链球菌烈性噬菌体的分离难度较大，导致其相关的噬菌体及噬菌体衍生的裂解酶报道都较少。

综上，如何提供一种广谱有效的链球菌噬菌体裂解酶是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种链球菌前噬菌体裂解酶lys733及其应用。本发明发现，在可致奶牛乳腺炎的无乳链球菌、停乳链球菌及乳房链球菌基因组中存在较多前噬菌体，在前噬菌体基因组中的噬菌体裂解酶是一种尚未被挖掘的潜在抗菌蛋白。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种链球菌前噬菌体裂解酶lys733，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

MTINTEQAIAWMAARQGKVTYSMARRDGASSYDCSSSIYYALRSAGASDNGWAVNTEYEHDWLVKNGYQLVAENELLYPKRGDIFVWGKRGYSAGAGGHTGMFVDDSNIIHCNYGYNGITVNDYNQIWYANGQPYEYLYRYIGSGLAPVNQQAVISQFERELDVNTPLSNSTMPYYEATISEDYYVESKPDANSEDKELLVAGTRVRVYEKINGWARINAPQSNQWVEDSYLIDATDM，SEQ ID NO.1。

一种编码上述链球菌前噬菌体裂解酶lys733的基因，其核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。