[发明专利]球孢白僵菌ZJB23323及其在合成R-2-(4羟基苯氧基)丙酸中的应用在审
| 申请号： | 202310558818.4 | 申请日： | 2023-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN116590153A | 公开（公告）日： | 2023-08-15 |
| 发明（设计）人： | 薛亚平;赵理想;邹树平;郑裕国 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N1/14 | 分类号： | C12N1/14;C12P7/42;C12R1/645 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;黄竞云 |
| 地址： | 310014 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 球孢白僵菌 zjb23323 及其 合成 羟基 苯氧基 丙酸 中的 应用 | ||
1.一种球孢白僵菌(Beauveria bassiana)ZJB23323，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCC NO：M 2023584，保藏日期：2023年04月21日，地址：中国，武汉，武汉大学，430072。
2.如权利要求1所述的球孢白僵菌ZJB23323在制备R-2-(4羟基苯氧基)丙酸中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述应用为：
将所述球孢白僵菌ZJB23323接种于含有R-2苯氧基丙酸的液体高转化筛选培养基A中，28℃，250r/min振荡培养3天，得到种子液；
将所述种子液以10％的体积接种量接种于含R-2苯氧基丙酸的液体高转化筛选培养基B中，28℃下进行发酵培养，所得发酵液经后处理，得到所述R-2-(4羟基苯氧基)丙酸。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述液体高转化筛选培养基A和液体高转化筛选培养基B都由以下终浓度的各组分组成：葡萄糖2wt％，酵母提取物1wt％，无水硫酸镁0.097wt％，无水氯化钙0.075wt％，磷酸二氢钾0.075wt％，磷酸氢二钾0.18wt％，R-2苯氧基丙酸5wt％，微量元素溶液5％v/v；调节pH为6.8，溶剂为水；其中，所述微量元素溶液由以下终浓度的各组分组成：1ml/L 2M硫酸水溶液，2000mg/L乙二胺四乙酸二钠，600mg/L七水硫酸亚铁，200mg/L七水硫酸锌，150mg/L一水硫酸锰，30mg/L硼酸，20mg/L六水氯化钴，40mg/L二水氯化铜，40mg/L二水氯化镍，5mg/L二水钼酸钠，溶剂为水。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述发酵培养的过程中还需要补充物料，所述发酵培养的总时间为12天，过程为：每两天补加一次蒸发的水，首先在28℃静置培养，第四天开始转移至50rpm，28℃摇床进行培养，其中第六天和第八天各补加一次葡萄糖和R-2苯氧基丙酸，每次补加葡萄糖的质量为60g/L液体高转化筛选培养基B，每次补加的R-2苯氧基丙酸的质量为30g/L液体高转化筛选培养基B。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述后处理为：将所述发酵液调节pH至5.5，离心，所得上清用0.22μm纳滤膜过滤，所得滤液加热到75℃，加终浓度为3g/L的活性炭，搅拌40min进行脱色，离心，所得上清液旋蒸浓缩至原体积20-30％，所得浓缩液经乙酸乙酯萃取，最后蒸发干燥得到R-2-(4羟基苯氧基)丙酸。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述蒸发干燥的操作为：乙酸乙酯萃取液在120℃蒸发，剩余液体采用无水硫酸钠干燥。
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