[发明专利]重组Lp（a）及其基因和制备方法、重组Lp（a）抗体在审
| 申请号： | 202310566208.9 | 申请日： | 2023-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN116621956A | 公开（公告）日： | 2023-08-22 |
| 发明（设计）人： | 卓越;王民燕;徐海燕;金照海 | 申请（专利权）人： | 宁波赛珀生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/39 | 分类号： | C07K14/39;C07K14/775;C12N15/81;C07K16/14;G01N33/92 |
| 代理公司： | 浙江中桓凯通专利代理有限公司 33376 | 代理人： | 周宁东 |
| 地址： | 315000 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 lp 及其 基因 制备 方法 抗体 | ||
1.一种重组Lp(a)，其特征在于，所述重组Lp(a)的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ IDNO.2或SEQ ID NO.3所示。
2.一种如权利要求1所述的重组Lp(a)的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6所示。
3.一种重组表达载体，其特征在于，包含权利要求2所述的重组Lp(a)的基因。
4.一种Lp(a)抗原，其特征在于，采用权利要求1所述的重组Lp(a)制备得到。
5.一种重组Lp(a)抗体，其特征在于，采用权利要求1所述的重组Lp(a)制备得到。
6.一种Lp(a)检测标准品，其特征在于，包含权利要求1所述的重组Lp(a)。
7.一种检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的重组Lp(a)或权利要求6所述的Lp(a)检测标准品。
8.一种重组Lp(a)的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S10：构建重组Lp(a)质粒：优化Lp(a)的氨基酸序列，优化后的氨基酸序列如SEQ IDNO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示，按照酵母偏好密码子，对所述优化后的氨基酸序列所对应的基因序列进行基因优化并合成克隆至pPICZalphaA载体，获得所述重组Lp(a)质粒；
S20：所述重组Lp(a)质粒的转化：将所述重组Lp(a)质粒进行线性化，将线性化后的重组Lp(a)质粒转化至酵母GS115感受态细胞，获得重组酵母转化子；
S30：将所述重组酵母转化子接种于含有G418的YPD平板上，筛选得到高拷贝转化子，获得重组高拷贝菌株；
S40：将所述重组高拷贝菌株依次接种至BMGY培养基和BMMY培养基，经甲醇诱导表达，离心，收集上清液，得到重组蛋白溶液；
S50：检测所述重组蛋白溶液中各单菌落的表达量，选取表达量最高的菌落进行划线接种，放大诱导表达，离心，收集上清液；
S60：采用Ni柱对所述S50得到的上清液进行纯化，得到所述重组Lp(a)。
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