[发明专利]一种提高裂解多糖单加氧酶异源可溶性表达的工程菌及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 202310607632.3 | 申请日： | 2023-05-26 |
| 公开（公告）号： | CN116656633A | 公开（公告）日： | 2023-08-29 |
| 发明（设计）人： | 柳志强;蔡雪;张晓健;华婧;李勉;郑裕国 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 冷红梅 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 裂解 多糖 单加氧酶异源 可溶性 表达 工程 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种裂解多糖单加氧酶，其特征在于：氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.一种如权利要求1所述的裂解多糖单加氧酶的编码基因，其特征在于：核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.携带如权利要求2所述的裂解多糖单加氧酶的编码基因的重组表达载体。
4.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体选自质粒、噬菌体和病毒载体。
5.根据权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为pET-28a(+)载体。
6.一种表达裂解多糖单加氧酶的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌含有如权利要求2所述裂解多糖单加氧酶的编码基因，或者所述基因工程菌含有如权利要求3-5之一所述的重组表达载体。
7.根据权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌为大肠杆菌。
8.权利要求6～7任一项所述基因工程菌在纤维素降解中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述应用的方法包括以下步骤：
(1)将所述基因工程菌培养，表达得到裂解多糖单加氧酶；
(2)将步骤(1)得到的裂解多糖单加氧酶加入纤维素降解体系进行纤维素降解；
其中，所述纤维素降解体系温度为50～60℃、pH为4.5～6.0。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述纤维素降解体系中含有金属离子，所述金属离子为Cu2+、Ni2+、Co2+、Zn2+、Mn2+、K+、Ca2+中的一种或多种。
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