[发明专利]一种鹿角杜鹃果实的消毒方法和无菌播种方法

说明书

本申请涉及杜鹃无菌培养的技术领域，具体公开了一种鹿角杜鹃果实的消毒方法和无菌播种方法。消毒方法包括以下步骤：S1、预清洗鹿角杜鹃果实；S2、以酸性溶液浸泡处理鹿角杜鹃果实；S3、将鹿角杜鹃果实以杀菌剂浸泡处理20‑30min，所述杀菌剂中的组分为：65‑75Vol.%乙醇溶液，10‑15wt%的芦荟浆，5‑15wt%苯丙咪唑类消毒剂和0.5‑1.5wt%表面活性剂；S4、以乙醇溶液和无菌水分别冲洗鹿角杜鹃果实，并无菌灼烧；S5、将鹿角杜鹃果实干燥至露出种子。本申请的消毒方法得到的鹿角杜鹃的种子杀菌彻底且播种后发芽率显著提高。

技术领域

本申请涉及杜鹃无菌培养的技术领域，更具体地说，它涉及一种鹿角杜鹃果实的消毒方法和无菌播种方法。

背景技术

鹿角杜鹃(Rhododendron latoucheae Franch.)为杜鹃花科杜鹃花属的常绿灌木或小乔木。鹿角杜鹃的果实为镰刀状细圆柱状，果实长度为33.80-43.28mm，直径为3.06-4.05mm，无毛。

通常情况下对鹿角杜鹃进行无菌培养时，一般选用的外植体是种子。但是在以种子进行无菌培养时，为了保证无菌培养，需要对种子外表面进行消毒杀菌。现有技术中通常以乙醇、水杨酸、氯化汞和次氯酸钠等中的一种或多种浸泡处理鹿角杜鹃种子后再进行无菌培养。但是这种处理方法存在的问题是：鹿角杜鹃种子细小，处理药剂和鹿角杜鹃种子直接接触后，虽可对种子杀菌，但也对种子造成损伤直接影响种子的萌发，使得发芽率不高；目前以该方法进行鹿角杜鹃的无菌播种时，种子发芽率仅仅为40％左右；该问题将直接影响鹿角杜鹃无菌培养的广泛应用。

因此，提供一种方法以提高鹿角杜鹃的种子无菌培养的发芽率是十分重要的。

发明内容

为了提高鹿角杜鹃种子无菌培养的发芽率，本申请提供一种鹿角杜鹃果实的消毒方法和无菌播种方法。

第一方面，本申请提供一种鹿角杜鹃果实的消毒方法，采用如下的技术方案：

一种鹿角杜鹃果实的消毒方法，包括以下步骤：

S1、预清洗处理：清洗鹿角杜鹃果实，以去除固体杂质和污垢；

S2、有机酸处理：将S1得到的鹿角杜鹃果实以酸性溶液浸泡处理，水洗，使得果实表面具有一定的粗糙度；

S3、杀菌剂处理：将S2得到的鹿角杜鹃果实以杀菌剂浸泡处理20-30min，以65-75Vol.％乙醇溶液的重量计，所述杀菌剂中的组分为：65-75Vol.％乙醇溶液，5-8wt％的芦荟浆，5-8wt％苯丙咪唑类消毒剂和0.5-1.5wt％表面活性剂；

S4、清洗处理：以65-75Vol.％乙醇溶液和无菌水分别冲洗S3得到的鹿角杜鹃果实，随后无菌灼烧鹿角杜鹃果实；

S5、干燥处理：将S4得到的鹿角杜鹃果实在无菌环境下干燥至鹿角杜鹃果实开裂，露出鹿角杜鹃种子即可。

在本申请方案中，杀菌剂是以65-75Vol.％乙醇溶液的重量为参考，随后添加芦荟浆、苯丙咪唑类消毒剂和表面活性剂的。例如：芦荟浆的添加量为65-75Vol.％乙醇溶液重量的10-15％。