[发明专利]人参五味子汤标准煎液冻干粉的指纹图谱检测方法及其指纹图谱

说明书

本发明公开了人参五味子汤标准煎液冻干粉的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，属于中药成分检测技术领域。通过取人参五味子汤标准煎液冻干粉供试品溶液，采用高效液相色谱法，以Hypersil C18ODS(4.6×250mm×5μm)为色谱柱，以0.1％磷酸水溶液(A)‑乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱，利用紫外可见光检测器，采用多波长切换进行检测。将检测结果通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行分析，建立人参五味子汤标准煎液冻干粉指纹图谱，并对不同批次样品进行分析，确定标准指纹图谱，通过质谱法指认出其中13个特征峰，能够较全面反映出其中所含化学成分的种类与数量，该方法具有稳定性好、精密度高、重现性好等特点，有较好的应用前景。

技术领域

本发明属于中药成分检测技术领域，具体涉及人参五味子汤标准煎液冻干粉的指纹图谱检测方法及其指纹图谱。

背景技术

人参五味子汤原方出自清代名医陈复正的名著《幼幼集成》，全方由人参、白术、茯苓、五味子、麦冬和甘草六味药材组成，内含四君子汤、生脉散二方，具有益气健脾、理气化痰、固卫养肺之效，主治“久嗽脾虚、中气怯弱、面白唇白”及“咳而久不止”等病症。方中人参大补元气“主补五藏”，以复气虚之本；配茯苓、白术、甘草补中健脾，淡湿助运，补中宫土气；配五味子收敛肺气，以固气泄之标；再用麦冬甘寒清润以清肺气。综观该方以四君子补脾，生脉散保肺，蕴含培土生金之妙。据现代药理学研究证实，它不仅可以增强单核吞噬细胞的吞噬功能，诱生干扰素，增强机体免疫功能，并有止咳、平喘、祛痰等对症治疗作用。其中人参皂苷、甘草酸、多糖类是主要活性成分。本方药性平和，口感良好，依从性高，具有很好的临床使用价值。

目前由于该方所含药材种类多且中药成分较为复杂，化学成分种类与数量不明确，成分判定困难，还未有人参五味子汤的指纹图谱检测方法。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供人参五味子汤标准煎液冻干粉的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，解决人参五味子汤中物质判定的难题。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了人参五味子汤标准煎液冻干粉的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：

S1、制备不同批次的人参五味子汤标准煎液冻干粉的供试品溶液；

S2、将S1中不同批次人参五味子汤标准煎液冻干粉的供试品溶液，注入高效液相色谱仪，色谱条件为：色谱柱：Hypersil C18 ODS，流动相A为0.1％磷酸水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱，检测波长：0-45min，280nm；45-50min，254nm；50-55min，220nm；55-110min，254nm，记录色谱图；

S3、根据S2中获得的不同批次人参五味子汤标准煎液冻干粉的供试品溶液的色谱图，制定基于人参五味子汤标准煎液冻干粉的指纹图谱，进行相似度评价，并通过质谱指认特征峰。

优选地，S1的具体步骤为：分别称取不同批次的人参五味子汤标准煎液冻干粉适量，置于具塞锥形瓶中，加甲醇溶液，超声提取，取滤液过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液。

进一步优选地，超声时间为60min。

优选地，S2中色谱条件为：洗脱程序为：0-10min 0.1％磷酸水溶液体积85％；10-15min 0.1％磷酸水溶液体积85％-75％；15-25min 0.1％磷酸水溶液体积75％-70％；25-30min 0.1％磷酸水溶液体积70％-55％；30-45min 0.1％磷酸水溶液体积55％-50％；45-55min 0.1％磷酸水溶液体积50％-45％；55-75min 0.1％磷酸水溶液体积45％-40％；75-80min 0.1％磷酸水溶液体积40％-48％；80-90min0.1％磷酸水溶液体积48％-70％；90-100min 0.1％磷酸水溶液体积70％-60％；100-110min 0.1％磷酸水溶液体积60％-95％。