[发明专利]一种鉴别非小细胞肺癌及其肺腺癌与肺鳞癌的标志物及鉴别方法

权利要求书

1.一种鉴别非小细胞肺癌及其肺腺癌与肺鳞癌的标志物，其特征在于：所述标志物为黏着斑复合物蛋白Focadhesin，所述Focadhesin调控非小细胞肺癌的生长、克隆形成、迁移和侵袭，黏着斑复合物蛋白Focadhesin在非小细胞肺癌中高表达，尤其在肺腺癌细胞中高表达，但在肺鳞癌细胞中低表达，从而鉴别肺腺癌与肺鳞癌。

2.一种利用权利要求1所述的鉴别非小细胞肺癌及其肺腺癌与肺鳞癌的鉴别方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

a.TCGA数据库分析FOCAD在肺腺癌与肺鳞癌中的表达；

b.通过Western Blotting检测Focadhesin在正常肺细胞与肺腺癌细胞株，癌旁正常组织与临床非小细胞肺癌组织样本中的表达；

c.使用慢病毒FOCADshRNA分别感染肺腺癌PC-9和H1975细胞株，嘌呤霉素筛选H1975细胞8天建立稳定表达FOCADshRNA细胞株，建立FOCAD敲低细胞模型，制备蛋白裂解液，Western Blotting检测Focadhesin表达；

d.瞬时敲低Focadhesin的PC-9细胞以及嘌呤霉素筛选8天建立稳定表达FOCADshRNAH1975细胞株，MTT实验检测FOCAD敲低对PC-9与H1975细胞活力的影响并定量分析；

e.嘌呤霉素筛选8天建立稳定表达FOCADshRNA细胞株H1975以及瞬时感染FOCADshRNA6天细胞株PC-9，细胞克隆形成实验并定量分析；

f.瞬时感染FOCADshRNA 6天细胞株PC-9，细胞划痕分析细胞迁移；

g.嘌呤霉素筛选8天建立稳定表达FOCADshRNA细胞株H1975以及瞬时感染FOCADshRNA6天细胞株PC-9，基质胶transwell分析细胞侵袭及其定量分析。