[发明专利]一株耐硫酸铵酿酒酵母及其筛选方法

说明书

本发明公开了一株耐硫酸铵酿酒酵母及其筛选方法，涉及生物技术领域，命名为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）Z‑1，并于2023年03月03日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：63227，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。本发明提供的耐硫酸铵酿酒酵母Z‑1可在1.0 mol/L NHsubgt;4/subgt;supgt;+/supgt;（6.6%硫酸铵）的环境下生长繁殖，且蛋白含量能够达到51.97%，以其作为蛋白饲料发酵菌株，不仅可以适应高耐受环境，还可以增加蛋白饲料的蛋白含量，是用于固态发酵的优良菌株。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体为一株耐硫酸铵酿酒酵母及其筛选方法。

背景技术

酿酒酵母具有很多优点，如生长周期短，发酵能力强、容易进行大规模培养，含有多种蛋白质、氨基酸、维生素、生物活性物质等丰富的营养成分等，在食品、医药等领域被广泛应用。同时，酿酒酵母也常被当做蛋白饲料的主要发酵菌株，在蛋白饲料中添加酿酒酵母，可以有效地提高饲料的营养价值，改善动物的生长发育状况；还可以改善饲料的风味和适口性，增加饲料的香味，从而提高动物对饲料的食欲和摄食量。此外，酿酒酵母中还含有丰富的有机酸和抗生素，可以替代一部分抗生素的使用，从而降低了养殖成本。在发酵过程中酿酒酵母的蛋白含量和耐受性一直是目前研究的热点。在蛋白饲料的生产中，硫酸铵为菌株的生长提供氮源，但高浓度的硫酸铵会抑制酵母菌的生长。利用耐盐酿酒酵母发酵蛋白饲料，可以增强其抗逆能力，使其在高渗透压的环境下仍能正常生长和发酵，从而提高产品的稳定性和质量。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一株耐硫酸铵酿酒酵母及其筛选方法，该耐硫酸铵酿酒酵母可以在较高浓度的硫酸铵环境下生长繁殖，是用于蛋白饲料固态发酵的优良菌株。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一株耐硫酸铵酿酒酵母，命名为酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae）Z-1，并于2023年03月03日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO：63227，保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

进一步地，所述酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae）Z-1能在1.0 mol/L NH₄⁺浓度环境下生长繁殖。

本发明还提供一种耐硫酸铵酿酒酵母的筛选方法，包括以下步骤：

S1：从葡萄自然发酵液中分离出多株酿酒酵母，并得到种子液，对多株酿酒酵母的种子液进行编号；

S2：初步筛选耐盐酿酒酵母：将S1中编号的酿酒酵母种子液分别接种于不同NH₄⁺浓度的硫酸铵琼脂培养基上进行培养，筛选出菌落大且饱满的3-5株酿酒酵母：

S3：测定生长曲线：将S1中编号的酿酒酵母种子液分别接种于YPD液体培养基中进行培养，绘制生长曲线并确定生长稳定期，筛选出生长稳定期内生长情况优良的3-5株酿酒酵母；

S4：测定蛋白含量：将S1中编号的酿酒酵母种子液接种于YPD液体培养基中进行培养得菌悬液，培养后测量菌悬液中蛋白含量，筛选出蛋白含量较多的3-5株酿酒酵母；

S5：综合分析比较S2、S3、S4中筛选出的酿酒酵母，从而筛选出高耐盐、生长情况优良的高蛋白酿酒酵母菌株。

进一步地，所述步骤S1中从葡萄自然发酵液中分离出15株酿酒酵母，并分别编号为：Z-1、Z-2、Z-3、Z-4、Z-5、Z-6、1-1、1-2、1-3、1-4、1-5、1-6、1-7、1-8、1-9。