[发明专利]一种玫瑰酶解抗氧化活性物质初提方法

说明书

一种玫瑰酶解抗氧化活性物质初提方法，属于一种玫瑰活性物质初提方法。以水为溶剂，采用超声辅助蛋白酶‑纤维素酶混合物提取法进行粗提的方法；步骤包括：步骤1、玫瑰‑蛋白酶‑纤维素酶混合物制备；步骤2、酶解；步骤、超声提取；步骤4、离心，收集上清粗提物。优点：以水为溶剂，采用超声辅助蛋白酶‑纤维素酶混合物提取法，不使用乙醇、石油醚、乙酸乙酯等有机溶剂，生产工艺简单，生成安全环保，使用时无有机溶剂带来的风险，在工业生产等应用领域范围更宽广。以水为溶剂，采用超声辅助蛋白酶‑纤维素酶混合物提取法获得的提取物无毒，环保，是真正具有功能性的绿色产品。兼具经济、活性高等优点，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种玫瑰活性物质初提方法，特别是一种玫瑰酶解抗氧化活性物质初提方法。

背景技术

玫瑰，蔷薇科蔷薇属灌木。玫瑰含有丰富的黄酮类、酚酸类、多糖等化合物。目前，从玫瑰中检测出的黄酮类成分高达30多种黄酮类，如黄酮苷、黄酮醇、山奈酚、二氢黄酮、槲皮素、芦丁、矢车菊素-3,5-二葡萄糖苷、芹菜素等。黄酮类物质具有良好的抗氧化、提高免疫力、抗衰老、抑溶血等功效。玫瑰花中酚酸类物质有原花青素、儿茶素、原儿茶酸、花色素苷、鞣酸、没食子酸、香草酸、咖啡酸、香豆酸、绿原酸、龙胆酸和对羟基肉桂酸等，它们对玫瑰花的抗氧化活性起到了关键作用，其中原花青素、槲皮素和鞣酸是主要的抗氧化成分，原花青素被誉为天然抗氧化剂，DPPH自由基清除能力分别是VE、VC的50倍和20倍。此外，玫瑰花中还含有多糖，多糖有抗肿瘤、抗突变、清除体外自由基的抗氧化活性等。可见，玫瑰花是提取天然抗氧化物质的适宜原料。

玫瑰花有效成分的提取方法主要有机械压榨法、水蒸气蒸馏法和溶剂萃取法等，近年来还发展了超临界CO₂萃取法、酶解法辅助水蒸汽蒸馏法和水提法。然而，这些方法存在一定的不足，如提取效率低、耗能高、设备投资大或环境不友好等。

所述的溶剂萃取法；该方法是以乙醇、丙酮等有机溶剂做萃取剂的提取方法，虽然提取的粗提物抗氧化活性较高，但因有机溶剂本身存在一定细胞毒性，在应用领域存在一定局限性。

所述的水提法即烘干型花瓣、冻干型花瓣，首先进行粉碎处理，花瓣与水料液比为1:40g/mL。50℃浸提花瓣，60℃浸提花蕊各三次，2h/次，离心，收集上清。具有更安全、成本更低、生物活性物质破坏较少等优势在工业生产等应用领域范围更宽广，但是水提法所得的玫瑰粗提物体外抗氧化活性不及有机溶剂萃取法。

发明内容

本发明的目的是要提供一种环保、安全、成本低廉的玫瑰酶解抗氧化活性物质初提方法，解决以有机溶剂做萃取剂而存在一定细胞毒性的问题。

本发明的目的是这样实现的：本发明方法是：以水为溶剂，采用超声辅助蛋白酶-纤维素酶混合物提取法进行粗提的方法；步骤包括：

步骤1、玫瑰-蛋白酶-纤维素酶混合物制备；

步骤2、酶解；

步骤、超声提取；

步骤4、离心，收集上清粗提物。

具体操作步骤为：

步骤(a)、称取蛋白酶-纤维素酶混合物，其质量比为1:2.5；用pH值为4-5的醋酸-醋酸钠作为缓冲体系的水溶解，得到质量浓度为5％蛋白酶-纤维素酶混合酶液；

步骤(b)、称取玫瑰原料并粉碎；选用玫瑰为干花时，混和气保护并低温粉碎至40目以上；其中混和气组分为：N₂：50％、CO₂：30％、H₂：20％；粉碎温度：4℃；选用玫瑰为湿花时，则进行组织捣碎；

步骤(c)、按每克玫瑰花加入2-14mg蛋白酶-纤维素酶混合物的比例，料液比为1:10-1:50加入步骤(a)配制的蛋白酶-纤维素酶混合酶液；