[发明专利]一种新型烟草制品用香料

权利要求书

1.一种新型烟草制品用香料；其特征在于；包括以下步骤：

步骤1；制备培养基；

LB培养基：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、蒸馏水；

YEPD培养基：酵母粉、葡萄糖、蛋白胨、蒸馏水；

筛选培养基：烟末、水、菌液；

步骤2；分离菌种；

将样品和无菌水放入洁净的锥形瓶中；在摇床内培养一段时间后；取出部分液体移至无菌水中；静置一段时间；

将上述步骤所得到的液体进行梯度稀释；将不同浓度的液体各取一定量分别接入到YEPD和LB两种培养基中；培养一段时间后；观察平板生长情况；选择单菌落较多且菌种多的梯度作为最适梯度；

在最适梯度的平板中观察菌落形状；边缘形态；表面是否存在凸起以及颜色质地；筛选得到除霉菌以外的所有不同形态的单菌落；并将分离出的菌株进行细菌和酵母区分；采用平板划线分离纯化菌株；并将得到的单个菌种接于LB和YEPD斜面培养基中；编号后保存；

步骤3；产香菌种的筛选；

将初步分离筛选出的菌种挑取一环；接入到LB和YEPD培养基中；放入摇床中进行培养；将活化好的菌液按照一定的料液比；接入到预先配制好并灭菌过的发酵培养基中；放入摇床中培养一段时间；重复上述步骤制取多组发酵液和空白对照组发酵液；做好标记；最终观察并记录发酵液香味特征；

将发酵好的样品与对照空白组进行感官香味特征对比分析；通过感官嗅辨总结分析各发酵液的感官香味特征；产生令人愉悦香气的；且明显区别于对照组香味的发酵液取出进行下一步；

步骤4；香料制备；

对发酵液进行浓缩处理；采用循环水式真空泵和旋转蒸发仪进行浓缩；除去大部分水分；得到粘稠膏状发酵香料；将得到的香料采用乙酸乙酯萃取；萃取后采用减压浓缩除去部分挥发性溶剂；对样品进行75％乙醇回溶；制备得到成品香料；即为电子烟烟用香料。

2.如权利要求1所述的一种新型烟草制品用香料，其特征在于，所述样品包括：优质烤烟红花大金元、新鲜水果、山楂酒和酵素；新鲜水果包括葡萄、苹果、乌梅、百香果、柠檬、柳橙。

3.如权利要求1所述的一种新型烟草制品用香料，其特征在于，所述梯度稀释的稀释梯度为10^-1-10^-7。

4.如权利要求1所述的一种新型烟草制品用香料，其特征在于，所述步骤3中，将活化好的菌液按料液比1：10接入预先配制好灭菌过的发酵培养基中，将配制好的发酵液分别在28℃下摇床培养24h；重复上述步骤制取多组发酵液和空白对照组发酵液，做好标记，最终观察记录发酵液香味特征。

5.如权利要求1所述的一种新型烟草制品用香料，其特征在于，所述步骤4中，对发酵液进行浓缩处理，浓缩比例按照3％进行，采用循环水式真空泵和旋转蒸发仪按比例进行浓缩，除去大部分水分，得到粘稠膏状发酵香料。将得到的香料采用乙酸乙酯萃取，萃取后采用减压浓缩除去部分挥发性溶剂，对样品进行75％乙醇回溶，制备得到成品香料。