[发明专利]一种简单、快速的体细胞化学重编程方法

权利要求书

1.一种简单、快速的体细胞化学重编程方法，其特征在于，包括：

S1.体细胞转变为胚外内胚层样细胞，这群细胞表达胚外内胚层相关基因；

S2.表观小分子的联合使用，使细胞整体表观修饰状态发生改变，细胞进入二细胞期胚胎样状态；

S3.细胞由二细胞期胚胎样状态转变为多潜能状态。

2.根据权利要求1所述简单、快速的体细胞化学重编程方法，其特征在于，所述体细胞为小鼠胚胎成纤维细胞。

3. 根据权利要求1所述简单、快速的体细胞化学重编程方法，其特征在于，步骤S1中诱导试剂为第一阶段诱导试剂，以KnockOut DMEM为基础，添加以下成分：10%胎牛血清，10%KSR，1% GlutaMAX-I，1%非必需氨基酸，1%青霉素-链霉素，0.1 mM β-巯基乙醇以及小分子40 μM CHIR99021，10 μM 616452，10 μM Forskolin，1 μM CH55和5 μM EPZ004777。

4. 根据权利要求1所述简单、快速的体细胞化学重编程方法，其特征在于，步骤S2中诱导试剂为第二阶段诱导试剂，为94% DMEM/DF12和Neurobasal按1:1混合液，1% N2添加物，2% B27添加物，1% GlutaMAX-I，1%非必需氨基酸，1%青霉素-链霉素，0.1 mM β-巯基乙醇，10 ng/ml白血病抑制因子，25 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子，50 μg/ml维他命C，2 mg/mlAlbumax II以及小分子1 mM VPA，10 μM CHIR99021，10 μM 616452，5 μMTranylcypromine，10 μM Forskolin，1 μM CH55，0.05 μM DZNep，0.5 μM Decitabine和5μM SGC0946。

5. 根据权利要求1所述简单、快速的体细胞化学重编程方法，其特征在于，步骤S3中诱导试剂为第三阶段诱导试剂，为94% DMEM/DF12和Neurobasal按1:1混合液，1% N2，2% B27，1% GlutaMAX-I，1%非必需氨基酸，1%青霉素-链霉素，0.1 mM β-巯基乙醇，10 ng/ml 白血病抑制因子，50 μg /ml维他命C，3 μM CHIR99021和1 μM PD0325901。

6. 根据权利要求5所述简单、快速的体细胞化学重编程方法，其特征在于，步骤S3中额外添加500 μM VPA。