[发明专利]一种含有生物阻断剂的肌酸激酶同工酶检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种含有生物阻断剂的肌酸激酶同工酶检测试剂盒，其包含第一试剂和第二试剂。本发明的生物阻断剂包含了针对嗜异性抗体、抗动物抗体、类风湿因子等干扰的多种动物免疫蛋白物质，对常规含量的内源干扰因素具有良好的阻断效果，能有效减少由于内源干扰造成检测的假阳性结果。通过向检测试剂中按v/v计0.1％至2％引入所述阻断剂，来改善检测中嗜异性抗体、抗动物抗体、类风湿因子、RF干扰以及改善检测结果假阳性。

技术领域

本发明属于诊断试剂技术领域，具体涉及免疫比浊法对肌酸激酶同工酶的检测。

背景技术

1960年CK首先被研究并认为可以用来诊断ACS，但是由于其特异性较差于1970年

后被肌酸激酶同工酶(CKMB)取代。随之，CKMB由于其具有较好的特异性和灵敏度被推荐为上一代心肌梗死(AMI)的诊断金标准。

胶乳增强免疫比浊法是一种抗原抗体结合动态测定方法，通过将待测的目的抗原

相对应的抗体包被在胶乳微球上，使抗原抗体结合物的体积增大，在检测光路中，透射光和

散射光的强度变化更为显著，从而提高检测的灵敏度。还可以将不同平均粒径的胶乳微球

组合使用，进一步提高检测的灵敏度和线性范围。但是，发明人在研究中发现，将胶乳增强

免疫比浊法应用于血液样本中的CK-MB的检测时，样本中存在的类风湿因子(rheumatoid

factor ,RF)会对检测造成干扰。另外，样品中的蛋白质等成分与抗体的非特异性结合导致背景信号，也会对检测造成干扰。

鉴于上述，本领域仍需要一种特异性高、假阳性低、抗RF干扰且价格低廉的CKMB的检测试剂盒。

发明内容

本发明提供了一种检测肌酸激酶同工酶CK-MB的胶乳增强免疫比浊法试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，其中R1试剂包含缓冲液、促凝剂、生物阻断剂、表面活性剂、保护剂、防腐剂，R2试剂包含缓冲液、CK-MB抗体包被纳米微球、保护剂、防腐剂；

其中，R2试剂中的缓冲液为TAPS，R1中的生物阻断剂包括动物免疫蛋白小鼠IgG、小鼠IgM、兔IgG、山羊IgG、牛IgG、马IgG中的至少一种；R2试剂的CK-MB抗体包被纳米微球中的纳米微球，为平均直径在100-200nm之间的小直径微球和平均直径在200-400nm之间的大直径微球按1:20-20:1体积比混合的复合纳米微球，浓度在0.02％-0.5％(w/v)之间。

其中R1缓冲液选自HEPES缓冲液、TRIS-HCl缓冲液、甘氨酸缓冲液的至少一种。

在一些实施方案中，R1防腐剂选自叠氮钠、硫柳汞、ProClin300的至少一种。

在一些实施方案中，所述R1表面活性剂选自Tween20、Tween80、NP40、thesit的至少一种。

在一些实施方案中，所述R2保护剂选自牛血清蛋白、卵清蛋白、脱脂乳、小牛血清的至少一种。

在一些实施方案中，R1中促凝剂为聚乙二醇，选自PEG6000、PEG8000、PEG12000、PEG20000的至少一种，优选PEG20000。

在一些实施方案中，所述R2中防腐剂为叠氮钠。

在一些实施方案中，R2中保护剂为牛血清蛋白、卵清蛋白、脱脂乳、小牛血清。

在一些实施方案中R1中的生物阻断剂为兔IgG（1%）+山羊IgG（1%）。

根据一些实施方案，提供了阻断剂在改善检测结果假阳性中的用途。

在一些实施方案中，所述阻断剂为生物复合阻断剂。在一些实施方案中，所述检测是指肌酸激酶同工酶乳胶增强免疫比浊法检测。