[发明专利]一种核酸内切酶及其应用在审
| 申请号： | 202310905132.8 | 申请日： | 2023-07-24 |
| 公开（公告）号： | CN116640743A | 公开（公告）日： | 2023-08-25 |
| 发明（设计）人： | 周家杰;冉冬;高展;刘懿;张秋磊;张建军;夏文娟;张维 | 申请（专利权）人： | 北京志道生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京知元同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11535 | 代理人： | 彭劲松 |
| 地址： | 100094 北京市海*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核酸 内切酶 及其 应用 | ||
1.一种核酸内切酶突变体，其特征在于，包括：(a)所述核酸内切酶突变体与SEQ IDNO.1所示氨基酸序列相比，含有如下至少一个位点：T43、G67、Q69、W89、Q99、G101、G132、S135、N136、F137、S140、N143、S145、F149、Q152、A154、Q169、N188或G222，经过氨基酸突变且具有核酸内切酶活性功能的蛋白质；或
(b)所述核酸内切酶突变体与(a)所示的氨基酸序列经过一个或几个保守氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加具有相同功能的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述的一种核酸内切酶突变体，其特征在于：所述核酸内切酶突变体包含选自下组的至少一个位点取代：T43E、G67E或G67K、Q69E、W89D、Q99K、G101K、S135K、N136R、F137E、S140E、N143D或N143K、S145D、F149D、Q152K、Q169D、188E、G222E或G222K。
3.如权利要求2所述的一种核酸内切酶突变体，其特征在于：所述核酸内切酶突变体包括如下所示的任一种氨基酸突变：
G67E+Q69E+S140E+N143D+S145D+F149D+Q169D+N188E+G222E；
Q69E+S140E+N143D+G222E；
G67K+N143K+Q152K+G222K；
T43E；
F138E；
W89D+N136R；
Q99K+G101K+S135K。
4.一种DNA分子，其特征在于，所述DNA分子编码权利要求1-3任一项所述的核酸内切酶突变体。
5.如权利要求4所述的DNA分子，其特征在于，所述DNA分子的核苷酸序列包括SEQ IDNO.2-7所示。
6.含有权利要求4所述DNA分子的重组载体、表达盒或宿主细胞。
7.一种试剂盒，包括1-3任一项所述的核酸内切酶突变体。
8.一种切割核酸的方法，其特征在于，利用权利要求1-3任一项所述的核酸内切酶突变体、权利要求4所述的DNA分子、权利要求5所述的重组载体、表达盒或宿主细胞。
9.一种制备权利要求1-3任一项所述核酸内切酶突变体的方法，其特征在于，培养权利要求6所述宿主细胞，并从培养物中得到核酸内切酶突变体。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述宿主细胞包括大肠杆菌。
11.权利要求1-3任一项所述核酸内切酶突变体、权利要求4或5所述DNA分子、权利要求6所述重组载体、表达盒或宿主细胞、权利要求7所述试剂盒在去除生物制品残留核酸中的应用。
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