[发明专利]百子莲组培快繁方法

说明书

百子莲组培快繁方法，属于生物组培技术。本发明的方法包括外植体获得、清洁、消毒、初代丛生芽诱导、继代丛生芽的增殖、丛生芽的生根培养和驯化步骤。其中，初代丛生芽的诱导培养基为MS+NAA 0.02‑0.05mg/L+IAA 0.01‑0.02mg/L+ZT 0.5‑0.8mg/L+2‑ip 0.1‑0.2mg/L；继代丛生芽的增殖培养基为改良MS+IAA 0.05‑0.08mg/L+ZT 1.2‑1.5mg/L+BR 0.03‑0.05mg/L；丛生芽的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2‑0.3mg/L+IAA 0.5‑0.8mg/L+椰汁50‑60ml/L。本发明的方法不论是消毒污染率、消毒死亡率、初代丛生芽诱导率、继代丛生芽增殖系数，还是生根率以及驯化成活率，均优于现有技术。

技术领域

本发明属于园艺和生物技术领域，特别涉及百子莲的组培快繁方法。

背景技术

百子莲（ Agapanthus praecox）为石蒜科百子莲属多年生常绿草本植物，原产南非，由于其观赏价值高，抗逆性强，逐渐被大众认知。随着国内市场的逐步拓展，国内逐步开展百子莲的优良品种（品系）筛选，使得百子莲品种（品系）多元化，但由于百子莲的主要繁殖方式为种子繁殖，而其存在繁殖周期长、易杂交变异等缺点，使得筛选出的优良品种（品系）不能短期内获得大量且稳定遗传母本性状的种苗。

近年来，对百子莲的组培繁育技术，大多采用诱导愈伤后，再进行芽的分化，最后获得生根苗的方法。现有报道中通过外植体直接诱导丛生芽的，存在诱导率低，同时增殖系数亦较低的问题。

发明内容

本发明针对现有技术不足，提出一种利用百子莲根状茎，不经过愈伤途径就能高效诱导丛生芽，再通过丛生芽的增殖以及生根，获得健壮生根苗的方法。

百子莲组培快繁方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

步骤1，取土表基部根状茎为外植体，并进行清洁；

步骤2，外植体消毒；

步骤3，初代丛生芽的诱导；

步骤4，继代丛生芽的增殖；

步骤5，丛生芽的生根培养；

步骤6，组培苗驯化管理；

步骤2所述的消毒方式是：采用75%酒精震摇消毒20-30s，然后采用0.1%升汞溶液震摇消毒4-5min，之后采用0.2%双氧水静置消毒12-24h，最后采用0.05%升汞溶液震摇消毒3-4min；

步骤3所述初代丛生芽的诱导培养基为MS+NAA 0.02-0.05mg/L+IAA 0.01-0.02mg/L+ZT 0.5-0.8mg/L+2-ip 0.1-0.2mg/L；

步骤4所述继代丛生芽的增殖培养基为改良MS+IAA 0.05-0.08mg/L+ZT 1.2-1.5mg/L+BR 0.03-0.05mg/L；

所述改良MS为以MS为基础，将硝酸铵用量改为3.00g/L，七水硫酸镁用量改为0.15g/L，二水氯化钙用量改为0.15g/L，糖用量改为45-50g/L，其余成分不变的MS；

步骤5所述丛生芽的生根培养基为1/2MS+NAA 0.2-0.3mg/L+IAA 0.5-0.8mg/L+椰汁50-60ml/L。

步骤1所述的根状茎外植体需完全剥去表皮鳞茎。

步骤6驯化培养基为按质量5:1配比的泥炭土与珍珠岩混合物。

本发明的技术效果表现为：

1、现有技术中大都采用的花梗、花苞、花蕾、叶片等外植体，季节性较强，而本发明采用土表根茎做外植体，一年四季均可采，不受季节限制。