[发明专利]针对AXL的抗体及其用途

说明书

本文公开了针对AXL的单克隆抗体、针对AXL和CD3的双特异性抗体、包含所述抗体的核酸、包含所述核酸的载体以及包含所述核酸或所述载体的宿主细胞。还公开了药物组合物和包含所述抗体的抗体‑药物缀合物，以及使用所述抗体的治疗方法。

技术领域

本发明涉及针对AXL的抗体，以及此类抗体的用途，特别是它们在癌症治疗中的用途。

发明背景

AXL是共享维生素K依赖性配体GAS6(生长停滞特异性6)的TAM(Tyro3-Axl-Mer)受体酪氨酸激酶(RTK)的成员。AXL基因克隆自人慢性粒细胞白血病(CML)细胞，在CML细胞中其编码140KDa的具有转化能力的蛋白质。AXL的蛋白质结构含有在细胞外区域的两个免疫球蛋白样结构域(Ig)和两个纤连蛋白III结构域、一个单次跨膜结构域和一个细胞内蛋白-酪氨酸激酶结构域。与大多数受体酪氨酸激酶相反，TAM受体的种系失活不会导致胚胎致死。年老的Tyro3-AXL-Mertk三重基因敲除小鼠可发展出多种退行性疾病，这些退行性疾病与吞噬细胞无法清除成年生殖系统、视网膜系统和免疫系统中的凋亡细胞和细胞膜有关。对种系Gas6和AXL缺陷小鼠的分析表明，GAS6/AXL信号传导在肝脏中的血小板聚集和血管完整性中起重要作用。来自缺乏Gas6或任何一种TAM受体(包括Axl)的小鼠的血小板聚集能力受损。虽然Gas6、AXL、Tyro3或Mertk缺陷小鼠在生理条件下不会出血，但这些小鼠不会形成危及生命的血栓。血小板上的GAS6/TAM信号传导激活PI3K/AKT信号传导以刺激β3整合素的酪氨酸磷酸化并经由αIIbβ3放大由外而内的信号传导以促进血小板激活和聚集。此外，GAS6和AXL均由在肝脏中调节血管通透性的内皮细胞表达。

大多数AXL信号传导以GAS6介导的配体依赖性方式发生。AXL激酶结构域内的激活突变在癌症中很少见(癌症基因组图谱，TCGA)。在癌症中，AXL信号传导可以由GAS6以自分泌或旁分泌的方式激活。临床上，肿瘤标本中的GAS6表达是尿路上皮癌、卵巢癌、肺腺癌、胃癌和胶质母细胞瘤的不良预后因素。过去十年的研究重点是阐明GAS6/AXL信号传导在肿瘤微环境中的功能作用，以及确定GAS6/AXL信号传导促进肿瘤进展的分子机制。

已在广泛的实体瘤和骨髓性白血病中检测到Axl受体过度表达(Linger等人,AdvCancer Res.100:35,2008；Linger等人,Expert Opin Ther Targets.14:1073,2010)。Axl表达与恶性肿瘤进展相关，并且是包括以下的多种恶性肿瘤患者总生存期较差的独立预测因子：胰腺癌(Song等人,Cancer.117:734,2011)、前列腺癌(Paccez等人,Oncogene.32:698,2013)、肺癌(Ishikawa等人Ann Surg Oncol.2012；Zhang等人,Nat Genet.44:852,2012)、乳腺癌(Gjerdrum,Proc natl Acad Sci USA107:1124,2010)、结肠癌(Yuen等人,PLoS One,8:e54211,2013)和急性髓系白血病(AML)(Ben-Batalla等人,Blood 122:2443,2013)。

临床和临床前研究表明AXL在肿瘤进展、转移和耐药性方面具有重要作用。这些发现提出了有趣的可能性，即AXL的治疗性靶向可以是有效的抗癌策略。AXL是有吸引力的治疗靶点，因为大部分AXL信号传导以由GAS6介导的配体依赖性方式发生。在癌症中，GAS6/AXL信号传导可以以自分泌或旁分泌的方式被肿瘤细胞以及肿瘤微环境内的细胞(包括巨噬细胞和产生生物学相关的GAS6来源的内皮细胞)激活。这允许包括中和GAS6、靶向AXL受体或抑制AXL酪氨酸激酶活性的抑制剂在内的几类AXL抑制剂的开发。

发明概述

本公开提供了靶向AXL或其抗原结合片段的新型抗体，其可以是单克隆抗体或双特异性抗体的形式，如双特异性T细胞衔接器(BiTE)。本文所公开的抗体能够与人AXL以高亲和力结合，介导效应细胞针对表达AXL的靶细胞(如各种癌细胞)的杀伤，从而表现出强的抗肿瘤活性。