[其他]白细胞介素-2的稳定组合物

说明书

本发明是一种用于药剂或其他方面的白细胞介素-2的组合物。

白细胞介素-2（以下简称为IL-2）是一种蛋白质，它具有作为T细胞和自然杀伤细胞生长因子的功能，并且认为这些细胞在体内免疫调节中起着重要作用，直接或间接地有助于消除癌或从免疫异常状态恢复正常及改善免疫低下状态（自然〔Nature〕302，305-〔1983〕）。由于IL-2具有这样的生理活性，因此人们寄希望于能把它作为一种新型抗瘤剂或对免疫缺陷的治疗剂来使用。

本发明的发明者们发现，IL-2是不稳定的，在对IL-2进行冷冻或冷冻干燥之后的储藏过程中，以及冷冻干燥之后的储藏过程中，它的活性很易损失，特别是在冷冻干燥这一步骤中，更是这样，并且把冷冻干燥的IL-2制剂重新溶解所得的液体一般都是混浊的。这些事实及其他一些事实，对把IL-2作为治疗的应用，是很不利的。

在这样的情况下，本发明的发明者们进行了广泛深入的研究。成功地制造出了一种稳定的IL-2的组合物，并且现已完成了本发明。

本发明提供了种种IL-2组合物，它含有血清白蛋白。一种还原化合物，或它们的一种结合物，并且是一种pH被调到3至6的溶液。

在实践本发明的过程中，所用的IL-2可以来源于任何哺乳动物，但以来源于人类的为更好。所用的IL-2可以是天然的或是DNA技术重组的产物，尽管用后一种更好。常用的型式为溶液状的IL-2。

IL-2的最好的例子是用遗传工程生产出的，非糖基化的人体IL-2，其通式为：

X-ALa（……见原文，共11行符号，其中X是甲硫酸氨酸或是氢，其混合物也能用。

在下面的式中，每一个氨基酸残基是用（IUPAC-IUB）委员会生物化学命名法所规定的缩写符号代表的。

IL-2具有理想的特异活性为20000～80000单位/毫升，具有优越性的液体形式的IL-2的活性为1～80000单位/毫升，以活性为10～50000单位/毫升为较好，，以活性为50～5000单位/毫升为更面上面这种液体形式的IL-2，在实践本发明的过程中是作为原料的，并以不含盐类，如氯化钠的为好。如果在提纯IL-2的过程中，所说的这种溶液被盐污染了，那么最好用超滤把盐除掉，如在使用之前就进行超滤。

人体血清蛋白（以下简写为HSA）可以是任意等级的。然而在本发明之用于医疗的组合物中，所说的HSA以用其质量适于肠胃外途径给药的为好。

例如，用健康人体血浆作为超始物，按照科思（Cohn）的第6种乙醇分法来分离和提纯HSA（美国化学协会杂志〔J.Am.chem    Soc〕68，459～475（1946）。

所述的HSA也还可以含有作为稳定剂的乙酰色氨酸钠或辛酸钠。

在上面所述的IL-2的浓度范围内，在每毫升液体IL-2中，所添加的HSA的水平以0.1～50毫克为好，以0.5～20毫克为更好。

还原化合物以生理上相容的还原化合物为好，包括含硫的还原化合物，例如谷胱甘肽），硫辛酸，N-乙酰半胱氨酸，N-乙酰半胱氨酸，硫二甘醇，硫乙醇胺，单硫甘油，二硫苏糖醇，含有1-7个碳原子的硫链烷酸类（如巯基乙酸，硫苹果酸），抗坏血酸及其上述成份的盐类以用酸性化合物为好，如谷胱甘肽，硫辛酸，N-乙酰半胱胺酸和抗坏血酸，并且以用谷胱甘肽和抗坏血酸最为适宜。

上述的还原化合物可以单独使用，也可以两个或两个以上结合使用。

这些还原化合物的用量，在每毫升含有上述IL-2浓度范围内的IL-2溶液中，以不少于0.01毫克为好，以0.05～20毫克为更好。

上述的HSA和还原化合物，在使用时，它们可以两者都在上述的范围内，或者其中一个在上述范围内，以HSA在上述范围内为好。

本发明之IL-2组合物还可进一步含有一种或更多的物质，这些物质是选自氨基酸中，特别是单氨脂肪族氨基酸和环氨基酸，如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸和脯氨酸，单糖类，如葡萄糖，甘露糖，糖醇类，如山梨糖醇和甘露糖醇，生理上相容的盐类及其衍生物。在这些辅助添加剂中，以用甘氨酸为最好。

在每毫升上述IL-2溶液中，上述的辅助添加剂的用量，对单糖和糖醇类以10～100毫克为好，对氨基酸类以5～50毫克为好。

本发明之IL-2组合物还可进一步含有等渗剂，氯化钠，缓冲液，如琥珀酸，酒石酸或柠檬酸，和/或表面活性剂。然而，从冷冻干燥过程中的稳定化观点来看，IL-2组合物中最好不含有氯化钠。